Wilms10T

Bunková línia Wilms10T bola odvodená zo vzorky primárneho Wilmsovho nádoru získaného od pacienta s Wilmsovým nádorom, detským nefroblastómom. Táto bunková línia je charakterizovaná homozygotnou deléciou génu WT1, čo vedie k úplnej strate funkcie WT1, kritického génu, ktorý sa podieľa na vývoji obličiek a udržiavaní normálnej diferenciácie obličiek. Na rozdiel od mnohých iných bunkových línií Wilmsovho nádoru, Wilms10T nemá žiadnu expresiu proteínu WT1, čo odráža závažné genetické zmeny prítomné v tomto podtype nádoru. Okrem toho bunková línia Wilms10T vykazuje stratu heterozygozity (LOH) v chromozómovej oblasti 11p15, ktorá zahŕňa dôležité gény, ako je IGF2, čo ďalej prispieva k jej nádorovým vlastnostiam.

Bunky Wilms10T majú stabilný normálny karyotyp bez väčších chromozomálnych prestavieb okrem špecifickej delécie oblasti WT1. Táto bunková línia sa vo veľkej miere využíva na štúdium účinkov úplnej straty WT1 na nádorovú biológiu vrátane jej vplyvu na bunkovú proliferáciu, diferenciáciu a reakciu na rôzne signálne dráhy. Bunky si zachovávajú mezenchýmové vlastnosti a exprimujú markery, ako je vimentín, pričom im chýbajú epitelové markery, ako je cytokeratín, čo poukazuje na ich stromálny pôvod.

Významný výskum sa zameral na signálne dráhy aktívne v bunkách Wilms10T. Proteomické štúdie preukázali, že tieto bunky vykazujú aktiváciu niekoľkých receptorových tyrozínkináz (RTK), ako sú IGF1R, PDGFRβ a AXL, o ktorých je známe, že podporujú tumorigenézu. Okrem toho sú v bunkách Wilms10T aktivované nadväzujúce signálne dráhy vrátane dráh MAPK a PI3K/AKT, čo prispieva k ich agresívnemu nádorovému fenotypu. Komplexná charakteristika Wilms10T z neho robí cenný model na skúmanie molekulárnych základov Wilmsovho nádoru s úplnou stratou WT1, ako aj na skúmanie potenciálnych terapeutických cieľov v tomto agresívnom podtype nádoru.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke