Wilms10T

Wilms10T rakuliin on saadud Wilmsi kasvaja primaarsest proovist, mis on saadud Wilmsi kasvaja (pediaatriline nefroblastoom) patsiendilt. Seda rakuliini iseloomustab WT1 geeni homosügootne deletsioon, mis põhjustab WT1 funktsiooni täielikku kadumist, mis on kriitiline geen, mis osaleb neerude arengus ja normaalse neerude diferentseerumise säilitamises. Erinevalt paljudest teistest Wilmsi tuumori rakuliinidest puudub Wilms10T-l igasugune WT1 valgu ekspressioon, mis peegeldab selles kasvajate alatüübis esinevaid tõsiseid geneetilisi muutusi. Lisaks sellele esineb Wilms10T rakuliinil heterosügootia kadu (LOH) kromosoomi 11p15 piirkonnas, mis hõlmab olulisi geene, nagu IGF2, mis aitab veelgi kaasa selle tuumorigeensetele omadustele.

Wilms10T rakkudel on stabiilne normaalne karüotüüp, millel puuduvad suuremad kromosoomiümberkorraldused, välja arvatud WT1 piirkonna spetsiifiline deletsioon. Seda rakuliini on laialdaselt kasutatud, et uurida WT1 täieliku kadumise mõju kasvajate bioloogiale, sealhulgas selle mõju rakkude proliferatsioonile, diferentseerumisele ja vastusele erinevatele signaaliradadele. Rakud säilitavad mesenhüümilised omadused, väljendades selliseid markereid nagu vimentiin, kuid neil puuduvad epiteelimarkerid nagu tsütokeratiin, mis viitab nende stromaalsele päritolule.

Märkimisväärsed uuringud on keskendunud Wilms10T rakkudes aktiivsetele signaaliradadele. Proteoomilised uuringud on näidanud, et neis rakkudes aktiveeruvad mitmed retseptori türosiini kinaasid (RTKd), nagu IGF1R, PDGFRβ ja AXL, mis teadaolevalt soodustavad kasvajate teket. Lisaks on Wilms10T rakkudes aktiveeritud allavoolu signaaliradasid, sealhulgas MAPK ja PI3K/AKT, mis aitavad kaasa nende agressiivsele kasvajafenotüübile. Wilms10T põhjalik iseloomustus teeb sellest väärtusliku mudeli Wilmsi kasvajate molekulaarsete aluste uurimiseks täieliku WT1 kadumisega, samuti potentsiaalsete terapeutiliste sihtmärkide uurimiseks selle agressiivse kasvajate alatüübi puhul.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest