Wilms2

Wilms2 rakuliin on saadud Wilmsi primaarsest Wilmsi kasvajast, mis pärineb WT1 mutatsiooniga pediaatrilisest patsiendist. Seda rakuliini iseloomustab homosügootne nonsense-mutatsioon WT1 geenis (c.1084 C>T, p.R362X), mille tulemuseks on kärbitud, mittefunktsionaalne WT1 valk. Neeru arenguks olulise WT1 geeni funktsionaalsuse kadumine on Wilmsi kasvaja teatavate alatüüpide, eriti nende, mis on seotud mesenhüümilise või stromaalse diferentseerumisega, tunnusjooneks. Wilms2 rakuliin on oluline mudel WT1 kaotusest tingitud kasvajaliste protsesside uurimiseks, eriti selliste Wilmsi kasvajate kontekstis, mis säilitavad teisi kriitilisi geneetilisi omadusi.

Wilms2 rakud kannavad mutatsioone ka CTNNB1 geenis, mis kodeerib β-kateniini, Wnt-signaaltee põhikomponenti. Need mutatsioonid, mis mõjutavad konkreetselt seriini 45, viivad β-kateniini stabiliseerumiseni ja akumuleerumiseni, mille tulemuseks on Wnt-tee konstitutiivne aktiveerimine. See aktiveerumine on teadaolevalt Wilmsi kasvaja rakkude proliferatsiooni ja kasvajate tekke ajendiks, mistõttu Wilms2 on väärtuslik mudel, et mõista, kuidas WT1-mutatsioonidega kasvajate arengule ja progresseerumisele aitab kaasa Wnt-signalisatsiooni kõrvalekaldumine.

Wilms2 rakkude fenotüüp on mesenhüümilaadse morfoloogiaga, mis ekspresseerib vimentiini ja millel puuduvad epiteeli markerid, nagu tsütokeratiin. See on kooskõlas kasvaja stromaalsete omadustega ja rõhutab WT1 rolli mesenhüümi-epiteeli ülemineku reguleerimisel neeru arengu ajal. Wilms2 proteoomilised analüüsid on tuvastanud mitmete retseptori türosiini kinaaside (RTK), sealhulgas PDGFRβ ja AXL aktiveerimise, mis teadaolevalt toetavad kasvajarakkude ellujäämist ja proliferatsiooni. Lisaks on aktiveeritud ka selliseid allavoolu radasid nagu MAPK ja PI3K/AKT, mis aitavad veelgi kaasa Wilms2 rakkude pahaloomulistele omadustele.

Kokkuvõttes on Wilms2 rakuliin oluline vahend Wilmsi kasvaja molekulaarmehhanismide uurimiseks, mis on tingitud WT1 kaotusest ja Wnt-signalisatsiooni kõrvalekaldumisest. Selle geneetilised ja fenotüüpilised omadused pakuvad tugevat platvormi võimalike terapeutiliste sihtmärkide uurimiseks ja peamiste signaaliradade rolli mõistmiseks mesenhüümilise komponendiga Wilmsi kasvajate patoloogias.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest