Wilms2

Клітинна лінія Wilms2 була отримана з первинної пухлини Вільмса у педіатричного пацієнта з мутацією зародкової лінії WT1. Ця клітинна лінія характеризується гомозиготною нонсенс-мутацією в гені WT1 (c.1084 C>T, p.R362X), що призводить до утворення усіченого, нефункціонального білка WT1. Втрата функціонального WT1, гена, необхідного для розвитку нирок, є характерною ознакою певних підтипів пухлини Вільмса, особливо тих, що пов'язані з мезенхімальним або стромальним диференціюванням. Клітинна лінія Wilms2 є важливою моделлю для вивчення пухлинних процесів, зумовлених втратою WT1, особливо в контексті пухлин Вільмса, які зберігають інші критичні генетичні особливості.

Клітини лінії Wilms2 також несуть мутації в гені CTNNB1, який кодує β-катенін, ключовий компонент сигнального шляху Wnt. Ці мутації, що конкретно впливають на серин 45, призводять до стабілізації та накопичення β-катеніну, що призводить до конститутивної активації шляху Wnt. Ця активація є відомим фактором проліферації клітин і пухлиноутворення в пухлині Вільмса, що робить Wilms2 цінною моделлю для розуміння того, як аберантна сигналізація Wnt сприяє розвитку і прогресуванню пухлин з мутаціями WT1.

З точки зору фенотипу, клітини Wilms2 демонструють мезенхімальну морфологію, експресують віментин і не мають епітеліальних маркерів, таких як цитокератин. Це узгоджується зі стромальними характеристиками пухлини і підкреслює роль WT1 в регуляції мезенхімально-епітеліальних переходів під час розвитку нирок. Протеомний аналіз Wilms2 виявив активацію декількох рецепторних тирозинкіназ (RTK), включаючи PDGFRβ і AXL, які, як відомо, підтримують виживання і проліферацію пухлинних клітин. Крім того, активуються наступні шляхи, такі як MAPK і PI3K/AKT, що ще більше посилює злоякісні властивості клітин лінії Wilms2.

В цілому, клітинна лінія Wilms2 слугує важливим інструментом для вивчення молекулярних механізмів пухлини Вільмса, зумовлених втратою WT1 та аберантною сигналізацією Wnt. Її генетичні та фенотипічні характеристики забезпечують надійну платформу для дослідження потенційних терапевтичних мішеней і розуміння ролі ключових сигнальних шляхів у патології пухлин Вільмса з мезенхімальним компонентом.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>