Wilms2

Dòng tế bào Wilms2 được phân lập từ một khối u Wilms nguyên phát ở một bệnh nhân nhi có đột biến gen WT1 dòng mầm. Dòng tế bào này có đặc điểm là đột biến vô nghĩa đồng hợp tử trong gen WT1 (c.1084 C>T, p.R362X), dẫn đến sản xuất protein WT1 bị cắt ngắn và không có chức năng. Sự mất chức năng của gen WT1, một gen thiết yếu cho sự phát triển của thận, là đặc trưng của một số thể loại u Wilms, đặc biệt là những thể liên quan đến sự biệt hóa mô liên kết hoặc mô đệm. Dòng tế bào Wilms2 là một mô hình quan trọng để nghiên cứu các quá trình gây ung thư do sự mất chức năng của WT1, đặc biệt trong bối cảnh các u Wilms vẫn giữ các đặc điểm di truyền quan trọng khác.

Tế bào Wilms2 cũng mang đột biến trong gen CTNNB1, mã hóa β-Catenin, một thành phần quan trọng của con đường tín hiệu Wnt. Các đột biến này, cụ thể ảnh hưởng đến serine 45, dẫn đến sự ổn định và tích tụ của β-Catenin, gây ra sự kích hoạt liên tục của con đường Wnt. Sự kích hoạt này là một yếu tố thúc đẩy sự tăng sinh tế bào và quá trình hình thành khối u trong u Wilms, khiến Wilms2 trở thành một mô hình quý giá để hiểu cách tín hiệu Wnt bất thường góp phần vào sự phát triển và tiến triển của các khối u có đột biến WT1.

Về mặt biểu hiện hình thái, tế bào Wilms2 có hình thái tương tự mô liên kết, biểu hiện vimentin và thiếu các dấu hiệu biểu mô như cytokeratin. Điều này phù hợp với đặc điểm mô liên kết của khối u và nhấn mạnh vai trò của WT1 trong việc điều chỉnh quá trình chuyển đổi mô liên kết-biểu mô trong quá trình phát triển thận. Phân tích proteomics của Wilms2 đã xác định sự hoạt hóa của một số thụ thể tyrosine kinase (RTKs), bao gồm PDGFRβ và AXL, vốn được biết đến là hỗ trợ sự sống còn và tăng sinh của tế bào ung thư. Ngoài ra, các con đường tín hiệu hạ lưu như MAPK và PI3K/AKT cũng được hoạt hóa, góp phần vào các đặc tính ác tính của tế bào Wilms2.

Tổng thể, dòng tế bào Wilms2 là công cụ thiết yếu để nghiên cứu các cơ chế phân tử của u Wilms do mất WT1 và tín hiệu Wnt bất thường gây ra. Các đặc điểm di truyền và biểu hiện của nó cung cấp nền tảng vững chắc để điều tra các mục tiêu điều trị tiềm năng và hiểu rõ vai trò của các con đường tín hiệu chính trong bệnh lý của u Wilms có thành phần trung mô.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.