Wilms2

Celična linija Wilms2 je bila pridobljena iz primarnega Wilmsovega tumorja pri pediatričnem bolniku z zarodno mutacijo WT1. Za to celično linijo je značilna homozigotna nonsense mutacija v genu WT1 (c.1084 C>T, p.R362X), zaradi katere nastaja skrajšana, nefunkcionalna beljakovina WT1. Izguba funkcionalnega proteina WT1, gena, ki je bistvenega pomena za razvoj ledvic, je značilna za nekatere podtipe Wilmsovega tumorja, zlasti tiste, ki so povezani z mezenhimsko ali stromalno diferenciacijo. Celična linija Wilms2 je pomemben model za preučevanje tumorigenih procesov, ki jih povzroča izguba WT1, zlasti v okviru tumorjev Wilms, ki ohranjajo druge kritične genetske značilnosti.

Celice Wilms2 imajo tudi mutacije v genu CTNNB1, ki kodira β-katenin, ključno sestavino signalne poti Wnt. Te mutacije, ki prizadenejo predvsem serin 45, povzročijo stabilizacijo in kopičenje β-katenina, kar vodi v konstitutivno aktivacijo poti Wnt. Ta aktivacija je znano gonilo celične proliferacije in tumorigeneze v Wilmsovem tumorju, zato je Wilms2 dragocen model za razumevanje, kako aberantna signalizacija Wnt prispeva k razvoju in napredovanju tumorjev z mutacijami WT1.

Po fenotipu imajo celice Wilms2 mezenhimsko morfologijo, izražajo vimentin in nimajo epitelijskih označevalcev, kot je citokeratin. To se ujema s stromalnimi značilnostmi tumorja in poudarja vlogo WT1 pri uravnavanju mezenhimsko-epitelijskih prehodov med razvojem ledvic. Proteomske analize Wilms2 so pokazale aktivacijo več receptorskih tirozinskih kinaz (RTK), vključno s PDGFRβ in AXL, za katere je znano, da podpirajo preživetje in proliferacijo tumorskih celic. Poleg tega se aktivirajo tudi nadaljnje poti, kot sta MAPK in PI3K/AKT, kar dodatno prispeva k malignim lastnostim celic Wilms2.

Na splošno je celična linija Wilms2 pomembno orodje za raziskovanje molekularnih mehanizmov tumorja Wilms, ki ga povzročata izguba WT1 in aberantna signalizacija Wnt. Njene genetske in fenotipske značilnosti zagotavljajo zanesljivo platformo za raziskovanje potencialnih terapevtskih ciljev in razumevanje vloge ključnih signalnih poti v patologiji tumorjev Wilms z mezenhimsko komponento.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo