Wilms1

Wilms1 rakuliin on saadud Wilmsi kasvaja primaarsest proovist, mis saadi patsiendilt, kellel esinesid suured kahepoolsed neerukasvajad, mis viitavad Wilmsi kasvajale, mis on pediaatriline nefroblastoom. Selles rakuliinis on homosügootne nonsense-mutatsioon WT1 geenis (c.149 C>A, p.S50X), mille tulemuseks on kärbitud ja mittefunktsionaalne WT1 valk. WT1-geen, mis on neerude arengu ja funktsiooni jaoks kriitilise tähtsusega, on Wilmsi kasvajate puhul sageli muteerunud, eriti stromaalse alatüübiga kasvajate puhul, millel on ektoopiline mesenhüümiline diferentseerumine. Wilms1 rakud kujutavad seega ainulaadset in vitro mudelit WT1 funktsiooni kaotuse tagajärgede uurimiseks kasvajate bioloogias.

Wilms1 rakuliin säilitab stabiilse karyotüübi ilma oluliste kromosoomianomaaliateta, mis võimaldab usaldusväärset pikaajalist kasvatamist. Nendel rakkudel on mesenhüümiline fenotüüp, mida iseloomustab vimentiini ekspressioon ja epiteeli markerite, näiteks tsütokeratiini puudumine, mis on kooskõlas nende stromaalse päritoluga. Lisaks sellele on rakuliinil piiratud, kuid märkimisväärne mesenhüümiline diferentseerumisvõime, sealhulgas võime diferentseeruda sobivatel tingimustel lihasarnasteks rakkudeks. See muudab Wilms1 asendamatuks vahendiks mesenhümaalse diferentseerumise molekulaarsete mehhanismide ja selle dereguleerimise uurimiseks Wilmsi kasvaja patogeneesis.

Wilms1 on kasutatud ka tuumori progresseerumises osalevate peamiste signaaliradade aktiveerimise seisundi uurimiseks. Proteoomilised analüüsid on näidanud, et Wilms1 rakkudes esineb mitmete retseptoritürosiini kinaaside, sealhulgas EGFR ja PDGFRβ, fosforüleerimine ja aktiveerimine, samuti allavoolu MAPK-signaaliradade aktiveerimine. Need leiud rõhutavad Wilms1 rakuliini olulisust Wilmsi kasvaja sihtotstarbeliste ravimeetodite uurimisel, uurides nende radade rolli vähirakkude ellujäämises, proliferatsioonis ja diferentseerumises.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest