Wilms1

สายเซลล์ Wilms1 ถูกแยกจากตัวอย่างเนื้องอก Wilms ชนิดปฐมภูมิที่เก็บจากผู้ป่วยซึ่งมีอาการเนื้องอกขนาดใหญ่ที่ไตทั้งสองข้าง ซึ่งเป็นลักษณะของเนื้องอก Wilms หรือเนื้องอกไตในเด็ก สายเซลล์นี้มีลักษณะกลายพันธุ์แบบโฮโมไซโกตชนิด nonsense mutation ในยีน WT1 (c.149 C>A, p.S50X) ซึ่งส่งผลให้เกิดโปรตีน WT1 ที่ถูกตัดทอนและไม่สามารถทำงานได้ยีน WT1 ซึ่งมีความสำคัญต่อการพัฒนาและการทำงานของไต มักเกิดการกลายพันธุ์ในเนื้องอกวิลมส์ โดยเฉพาะในชนิดย่อยที่มีสโตรมาซึ่งแสดงการแยกตัวเป็นเนื้อเยื่อเมเซนไคม์ที่ผิดตำแหน่ง ดังนั้น เซลล์ Wilms1 จึงเป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่มีเอกลักษณ์เฉพาะสำหรับการศึกษาผลกระทบของการสูญเสียการทำงานของยีน WT1 ในชีววิทยาของเนื้องอก

สายเซลล์ Wilms1 รักษาโครโมโซมแบบคงที่โดยไม่มีลักษณะผิดปกติของโครโมโซมที่สำคัญ ทำให้สามารถเพาะเลี้ยงในระยะยาวได้อย่างน่าเชื่อถือ เซลล์เหล่านี้แสดงลักษณะทางฟีโนไทป์แบบมีเซนไคม์ ซึ่งมีลักษณะเด่นคือการแสดงออกของวีเมนตินและการขาดเครื่องหมายของเซลล์เยื่อบุผิว เช่น ไคโตแครทิน ซึ่งสอดคล้องกับต้นกำเนิดจากสโตรมาของพวกมันนอกจากนี้ สายเซลล์นี้ยังแสดงให้เห็นถึงความสามารถในการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์เมเซนไคม์ที่จำกัดแต่มีนัยสำคัญ รวมถึงความสามารถในการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์คล้ายกล้ามเนื้อภายใต้สภาวะที่เหมาะสม สิ่งนี้ทำให้ Wilms1 เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษาเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกระดับโมเลกุลของการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์เมเซนไคม์และการควบคุมที่ผิดปกติในกระบวนการเกิดเนื้องอก Wilms

Wilms1 ยังถูกใช้ในการศึกษาสถานะการกระตุ้นของเส้นทางการส่งสัญญาณสำคัญที่เกี่ยวข้องกับการเจริญเติบโตของเนื้องอกการวิเคราะห์โปรตีโอมิกส์แสดงให้เห็นว่าเซลล์ Wilms1 แสดงการฟอสโฟรีเลชันและการกระตุ้นของไทโรซีนไคเนสตัวรับหลายชนิด รวมถึง EGFR และ PDGFRβ รวมถึงเส้นทางการส่งสัญญาณ MAPK ที่อยู่ถัดไป ผลการศึกษานี้เน้นถึงความสำคัญของสายพันธุ์เซลล์ Wilms1 ในการสำรวจแนวทางการรักษาแบบมุ่งเป้าสำหรับเนื้องอก Wilms โดยการแยกบทบาทของเส้นทางเหล่านี้ในการอยู่รอด การเพิ่มจำนวน และการเปลี่ยนแปลงของเซลล์มะเร็ง

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.