Wilms6

สายเซลล์ Wilms6 ถูกสร้างขึ้นจากเนื้องอก Wilms ชนิดปฐมภูมิในผู้ป่วยเด็กที่มีการกลายพันธุ์ WT1 ในสายพันธุกรรมปกติ สายเซลล์นี้ถูกกำหนดโดยการกลายพันธุ์แบบ nonsense แบบโฮโมไซโกตในยีน WT1 (c.1168 C>T, p.R390X) ซึ่งส่งผลให้เกิดโปรตีน WT1 ที่ถูกตัดทอนและไม่สามารถทำงานได้WT1 เป็นตัวควบคุมที่สำคัญในการพัฒนาของไต และการสูญเสียของมันมีความสัมพันธ์อย่างมากกับเนื้องอก Wilms โดยเฉพาะในกรณีที่แสดงการแยกตัวเป็นเซลล์เมเซนไคม์ สายพันธุ์เซลล์ Wilms6 เป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาผลกระทบของการสูญเสีย WT1 อย่างสมบูรณ์ โดยเฉพาะในบริบทของเนื้องอกที่แสดงลักษณะทั้งของเซลล์เยื่อบุผิวและเมเซนไคม์

เซลล์ Wilms6 ยังมีการกลายพันธุ์ในยีน CTNNB1 โดยเฉพาะที่ตำแหน่งซีรีน 45 (p.S45F) ซึ่งเป็นตำแหน่งสำคัญสำหรับการฟอสโฟรีเลชันที่ควบคุมการสลายตัวของ β-Catenin การกลายพันธุ์นี้นำไปสู่การคงอยู่และการสะสมในนิวเคลียสของ β-Catenin ส่งผลให้เกิดการกระตุ้นอย่างต่อเนื่องของเส้นทางสัญญาณ Wntการกระตุ้นสัญญาณ Wnt ที่ผิดปกติเป็นปัจจัยขับเคลื่อนที่รู้จักกันดีในการเพิ่มจำนวนเซลล์และการเกิดเนื้องอกในเนื้องอก Wilms ทำให้ Wilms6 เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการศึกษาบทบาทของการทำงานผิดปกติของเส้นทาง Wnt ในเนื้องอกที่มีการกลายพันธุ์ของ WT1

ในเชิงฟีโนไทป์ เซลล์ Wilms6 แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาแบบมีเซนไคม์ โดยมีการแสดงออกของวีเมนตินอย่างเด่นชัดและขาดเครื่องหมายของเซลล์เยื่อบุผิว เช่น ไคโตแครทิน สะท้อนถึงลักษณะของเนื้อเยื่อฐานของเนื้องอกต้นกำเนิด เซลล์เหล่านี้แสดงให้เห็นถึงศักยภาพในการเปลี่ยนแปลงไปเป็นเซลล์ชนิดอื่นได้ แม้จะมีจำกัดแต่ก็มีความโดดเด่น รวมถึงความสามารถในการเปลี่ยนแปลงไปเป็นเซลล์คล้ายกล้ามเนื้อภายใต้สภาวะเฉพาะ ซึ่งสะท้อนถึงการเปลี่ยนสภาพไปเป็นมีเซนไคม์ที่พบในเนื้องอก Wilms บางชนิดการศึกษาโปรตีโอมิกส์ของ Wilms6 ได้ระบุการกระตุ้นของไทโรซีนไคเนสชนิดรีเซพเตอร์ (RTKs) หลายชนิด รวมถึง PDGFRβ และ AXL ซึ่งมีส่วนเกี่ยวข้องในการส่งเสริมการอยู่รอด การเพิ่มจำนวน และการเคลื่อนที่ของเซลล์ การกระตุ้นของเส้นทางสัญญาณในขั้นถัดไป เช่น MAPK และ PI3K/AKT ยิ่งตอกย้ำลักษณะที่ก้าวร้าวของสายพันธุ์เซลล์นี้

โดยรวมแล้ว สายเซลล์ Wilms6 ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองที่สำคัญในการสำรวจกลไกโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการพัฒนาของเนื้องอก Wilms โดยเฉพาะในกรณีที่มีการสูญเสีย WT1 อย่างสมบูรณ์ร่วมกับการกระตุ้นสัญญาณ Wnt ลักษณะทางพันธุกรรมและฟีโนไทป์ของมันทำให้เป็นแพลตฟอร์มที่ยอดเยี่ยมสำหรับการศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างความบกพร่องของ WT1 และเส้นทางสัญญาณที่ผิดปกติ ให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับเป้าหมายการรักษาที่เป็นไปได้สำหรับเนื้องอกชนิดรุนแรงนี้

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.