Wilms6

קו התאים Wilms6 הוקם מגידול Wilms ראשוני בחולה ילדים עם מוטציה בגן WT1. קו תאים זה מוגדר על ידי מוטציה הומוזיגוטית חסרת משמעות בגן WT1 (c.1168 C>T, p.R390X), אשר גורמת לחלבון WT1 מקוצר ולא תפקודי. WT1 הוא רגולטור קריטי בהתפתחות הכליות, ואובדנו קשור קשר הדוק לגידול וילמס, במיוחד במקרים המציגים בידול מזנכימלי. קו התאים Wilms6 הוא מודל חשוב לחקר ההשפעות הטומורגניות של אובדן WT1 מוחלט, במיוחד בהקשר של גידולים המציגים מאפיינים אפיתלליים ומזנכימליים כאחד.

תאי Wilms6 נושאים גם מוטציה בגן CTNNB1, המשפיעה באופן ספציפי על סרין 45 (p.S45F), אתר מפתח לזרחון המווסת את פירוק β-קטנין. מוטציה זו מובילה לייצוב ולהצטברות גרעינית של β-קטנין, וכתוצאה מכך להפעלה קונסטיטוטבית של מסלול האיתות Wnt. הפעלה חריגה של מסלול Wnt היא גורם ידוע להתרבות תאים וליצירת גידולים בגידולי וילמס, מה שהופך את Wilms6 לכלי חשוב לחקר תפקידו של חוסר ויסות מסלול Wnt בגידולים עם מוטציות WT1.

מבחינה פנוטיפית, תאי Wilms6 מציגים מורפולוגיה מזנכמלית, עם ביטוי חזק של וימנטין והיעדר סמנים אפיתלליים כגון ציטוקראטין, המשקפים את האופי הסטרומלי של הגידול המקורי. תאים אלה הוכחו כבעלי פוטנציאל התמיינות מוגבל אך בולט, כולל היכולת להתמיין לתאים דמויי שריר בתנאים ספציפיים, המשקף את ההתמיינות המזנכמלית הנצפית בחלק מגידולי וילמס. מחקרים פרוטאומיים של Wilms6 זיהו הפעלה של מספר קולטני טירוזין קינאז (RTK), כולל PDGFRβ ו-AXL, המעורבים בקידום הישרדות, התרבות ונדידה של תאים. ההפעלה במורד הזרם של מסלולי איתות כגון MAPK ו-PI3K/AKT מדגישה עוד יותר את האופי האגרסיבי של קו תאים זה.

בסך הכל, קו התאים Wilms6 משמש מודל חיוני לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס התפתחות גידולי וילמס, במיוחד במקרים של אובדן מוחלט של WT1 בשילוב עם הפעלת איתות Wnt. מאפייניו הגנטיים והפנוטיפיים הופכים אותו לפלטפורמה מצוינת לחקר האינטראקציה בין מחסור ב-WT1 למסלולי איתות חריגים, ומספקים תובנות לגבי מטרות טיפוליות פוטנציאליות עבור סוג גידול אגרסיבי זה.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו