Wilms6

Η κυτταρική σειρά Wilms6 δημιουργήθηκε από πρωτοπαθή όγκο Wilms σε παιδιατρικό ασθενή με γεννητική μετάλλαξη WT1. Αυτή η κυτταρική σειρά καθορίζεται από μια ομόζυγη μετάλλαξη μη-νοήματος στο γονίδιο WT1 (c.1168 C>T, p.R390X), η οποία οδηγεί σε μια κουτσουρεμένη και μη λειτουργική πρωτεΐνη WT1. Η WT1 είναι ένας κρίσιμος ρυθμιστής της ανάπτυξης των νεφρών και η απώλειά της συνδέεται στενά με τον όγκο Wilms, ιδίως σε περιπτώσεις που εμφανίζουν μεσεγχυματική διαφοροποίηση. Η κυτταρική σειρά Wilms6 αποτελεί σημαντικό μοντέλο για τη μελέτη των καρκινικών επιδράσεων της πλήρους απώλειας της WT1, ιδίως στο πλαίσιο όγκων που εμφανίζουν τόσο επιθηλιακά όσο και μεσεγχυματικά χαρακτηριστικά.

Τα κύτταρα Wilms6 φέρουν επίσης μια μετάλλαξη στο γονίδιο CTNNB1, που επηρεάζει συγκεκριμένα τη σερίνη 45 (p.S45F), μια βασική θέση φωσφορυλίωσης που ρυθμίζει την αποικοδόμηση της β-κατενίνης. Η μετάλλαξη αυτή οδηγεί στη σταθεροποίηση και την πυρηνική συσσώρευση της β-Catenin, με αποτέλεσμα τη συστατική ενεργοποίηση του σηματοδοτικού μονοπατιού Wnt. Η παρεκκλίνουσα ενεργοποίηση της σηματοδότησης Wnt είναι ένας γνωστός παράγοντας που οδηγεί στον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και την καρκινογένεση στους όγκους Wilms, καθιστώντας το Wilms6 ένα πολύτιμο εργαλείο για τη διερεύνηση του ρόλου της απορρύθμισης του μονοπατιού Wnt σε όγκους με μεταλλάξεις του WT1.

Φαινοτυπικά, τα κύτταρα Wilms6 εμφανίζουν μεσεγχυματική μορφολογία, με έντονη έκφραση της βιμεντίνης και απουσία επιθηλιακών δεικτών όπως η κυτταροκερατίνη, γεγονός που αντανακλά τη στρωματική φύση του αρχικού όγκου. Τα κύτταρα αυτά έχει αποδειχθεί ότι διαθέτουν περιορισμένη αλλά αξιοσημείωτη δυνατότητα διαφοροποίησης, συμπεριλαμβανομένης της ικανότητας διαφοροποίησης σε μυϊκά κύτταρα υπό συγκεκριμένες συνθήκες, η οποία αντικατοπτρίζει τη μεσεγχυματική διαφοροποίηση που παρατηρείται σε ορισμένους όγκους Wilms. Οι πρωτεομικές μελέτες του Wilms6 έχουν εντοπίσει την ενεργοποίηση πολλαπλών κινασών τυροσίνης υποδοχέα (RTKs), συμπεριλαμβανομένων των PDGFRβ και AXL, οι οποίες εμπλέκονται στην προώθηση της επιβίωσης, του πολλαπλασιασμού και της μετανάστευσης των κυττάρων. Η κατάντη ενεργοποίηση σηματοδοτικών μονοπατιών όπως οι MAPK και PI3K/AKT υπογραμμίζει περαιτέρω την επιθετική φύση αυτής της κυτταρικής σειράς.

Συνολικά, η κυτταρική σειρά Wilms6 χρησιμεύει ως κρίσιμο μοντέλο για τη διερεύνηση των μοριακών μηχανισμών που διέπουν την ανάπτυξη του όγκου Wilms, ιδίως σε περιπτώσεις πλήρους απώλειας του WT1 σε συνδυασμό με ενεργοποίηση της σηματοδότησης Wnt. Τα γενετικά και φαινοτυπικά χαρακτηριστικά της την καθιστούν μια εξαιρετική πλατφόρμα για τη μελέτη της αλληλεπίδρασης μεταξύ της έλλειψης WT1 και των ανώμαλων σηματοδοτικών μονοπατιών, παρέχοντας πληροφορίες για πιθανούς θεραπευτικούς στόχους για αυτόν τον επιθετικό τύπο όγκου.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης