Wilms6

تم إنشاء سلالة خلايا ويلمز6 من ورم ويلمز الأولي لدى مريض أطفال مصاب بطفرة WT1 في السلالة الجرثومية. يتم تعريف هذا الخط الخلوي من خلال طفرة متماثلة الزيجوت غير منطقية في جين WT1 (ج. 1168 C>T، p.R390X)، مما يؤدي إلى بروتين WT1 مبتور وغير فعال. يعتبر WT1 منظمًا حاسمًا لنمو الكلى، ويرتبط فقدانه ارتباطًا وثيقًا بورم ويلمز، خاصةً في الحالات التي تظهر تمايزًا في اللُّحمة المتوسطة. ويُعد خط خلايا ويلمز6 نموذجًا مهمًا لدراسة التأثيرات الورمية لفقدان بروتين WT1 الكامل، خاصةً في سياق الأورام التي تظهر خصائص طلائية وميزانوية في آن واحد.

تحمل خلايا ويلمز6 أيضاً طفرة في جين CTNNB1 تؤثر تحديداً على سيرين 45 (p.S45F)، وهو موقع رئيسي للفسفرة التي تنظم تحلل بيتا كاتينين. تؤدي هذه الطفرة إلى استقرار وتراكم نووي لـ β-Catenin، مما يؤدي إلى التنشيط التأسيسي لمسار إشارات Wnt. ويُعد التنشيط الشاذ لإشارات Wnt محركاً معروفاً لتكاثر الخلايا وتكوّن الأورام في أورام ويلمز، مما يجعل من ويلمز6 أداة قيّمة لدراسة دور خلل تنظيم مسار Wnt في الأورام المصابة بطفرات WT1.

من الناحية النمطية، تُظهر خلايا ويلمز6 مورفولوجيا الوسيطة اللُّحمية مع تعبير قوي عن الفيمينتين وغياب العلامات الظهارية مثل السيتوكراتين، مما يعكس الطبيعة اللحمية للورم الأصلي. وقد ثبت أن هذه الخلايا تمتلك قدرة محدودة ولكن ملحوظة على التمايز، بما في ذلك القدرة على التمايز إلى خلايا شبيهة بالعضلات في ظل ظروف محددة، وهو ما يعكس التمايز الوسيمي الوسيطي الذي لوحظ في بعض أورام ويلمز. وقد حددت الدراسات البروتينية لويلمز6 تنشيط العديد من مستقبلات التيروزين كيناز (RTKs)، بما في ذلك PDGFRβ وAXL، والتي تشارك في تعزيز بقاء الخلايا وتكاثرها وهجرتها. كما يؤكد التنشيط النهائي لمسارات الإشارات مثل MAPK وPI3K/AKT على الطبيعة العدوانية لهذا الخط الخلوي.

وبشكل عام، يُستخدم خط خلايا ويلمز6 كنموذج حاسم لاستكشاف الآليات الجزيئية الكامنة وراء تطور ورم ويلمز، خاصةً في حالات الفقدان الكامل لورم ويلمز1 مع تنشيط إشارات Wnt. إن خصائصه الوراثية والمظهرية تجعله منصة ممتازة لدراسة التفاعل بين نقص WT1 ومسارات الإشارات الشاذة، مما يوفر رؤى حول الأهداف العلاجية المحتملة لهذا النوع من الأورام العدوانية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان