Wilms8

קו התאים Wilms8 נגזר מגידול Wilms ראשוני בחולה ילדים עם מוטציה בגן WT1. קו תאים זה מאופיין במוטציה הומוזיגוטית חסרת משמעות בגן WT1 (c.1168 C>T, p.R390X), המובילה לאובדן מוחלט של תפקוד WT1. WT1 חיוני להתפתחות תקינה של הכליות, והשבתתו היא תכונה נפוצה בסוגים מסוימים של גידולי וילמס אגרסיביים, במיוחד אלה המפגינים הבחנה מזנכמלית. לפיכך, Wilms8 מספק מודל חשוב לחקר ההשפעות של אובדן WT1 על התפתחות גידולים, במיוחד בהקשר של גידולי וילמס המופיעים עם מרכיב סטרומלי בולט.

בנוסף למוטציה ב-WT1, תאי Wilms8 נושאים מוטציה בגן CTNNB1 (p.S45A), המקודד ל-β-Catenin, רגולטור מרכזי במסלול האיתות Wnt. המוטציה בסרין 45 משבשת את תהליך הזרחון התקין המוביל לפירוק β-Catenin, וגורמת לייצובו ולהצטברותו בגרעין. התוצאה היא הפעלה קונסטיטוטבית של מסלול Wnt, המניעה את התרבות התאים ותורמת לתכונות האונקוגניות של קו התאים Wilms8. האינטראקציה בין אובדן WT1 לבין מסלול Wnt חריג ב-Wilms8 הופכת אותו למודל חיוני להבנת המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס מסלולים אלה בביולוגיה של גידולי וילמס.

תאי Wilms8 מציגים פנוטיפ מזנכימלי, המאופיין בביטוי של וימנטין ובהיעדר סמנים אפיתלליים כגון ציטוקראטין. זה תואם את ההבחנה הסטרומלית שנצפתה בגידול המקורי. התאים מפגינים יכולת מוגבלת לעבור הבחנה מזנכימלית נוספת, כגון יצירת תאים דמויי שריר בתנאים ספציפיים. ניתוחים פרוטאומיים של Wilms8 חשפו הפעלה של מספר קולטני טירוזין קינאז (RTK), כולל PDGFRβ ו-AXL, המעורבים בתהליכים מרכזיים כגון הישרדות תאים, נדידה והתפשטות. ההפעלה של מסלולי איתות במורד הזרם, במיוחד מסלולי MAPK ו-PI3K/AKT, תורמת עוד יותר למאפיינים האגרסיביים של תאי Wilms8.

בסך הכל, קו התאים Wilms8 משמש ככלי חיוני לחקר הבסיס המולקולרי של גידול וילמס המונע על ידי אובדן WT1 ואיתות Wnt חריג. תכונותיו הגנטיות והפנוטיפיות הופכות אותו לפלטפורמה איתנה לחקר האינטראקציה בין מסלולים קריטיים אלה ולזיהוי מטרות טיפוליות פוטנציאליות בגידולי וילמס עם מרכיב סטרומלי.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו