Wilms1

Wilms1 hücre hattı, pediatrik bir nefroblastom olan Wilms tümörünün göstergesi olan büyük bilateral böbrek tümörleri ile başvuran bir hastadan elde edilen birincil Wilms tümör örneğinden türetilmiştir. Bu hücre hattı, WT1 geninde (c.149 C>A, p.S50X) kesilmiş ve işlevsel olmayan bir WT1 proteini ile sonuçlanan homozigot saçma bir mutasyon barındırmaktadır. Böbrek gelişimi ve işlevi için kritik olan WT1 geni, Wilms tümöründe, özellikle de ektopik mezenkimal farklılaşma sergileyen stromal alt tipe sahip olanlarda sıklıkla mutasyona uğramaktadır. Bu nedenle Wilms1 hücreleri, tümör biyolojisinde WT1 işlev kaybının sonuçlarını incelemek için benzersiz bir in vitro modeli temsil etmektedir.

Wilms1 hücre hattı, önemli kromozomal anormallikler olmaksızın stabil bir karyotipi koruyarak güvenilir uzun süreli kültüre olanak sağlar. Bu hücreler, stromal kökenleriyle tutarlı olarak vimentin ekspresyonu ve sitokeratin gibi epitelyal belirteçlerin yokluğu ile karakterize mezenkimal bir fenotip sergilemektedir. Ek olarak, hücre hattı, uygun koşullar altında kas benzeri hücrelere farklılaşma yeteneği de dahil olmak üzere sınırlı ancak dikkate değer mezenkimal farklılaşma kapasitesi gösterir. Bu da Wilms1'i mezenkimal farklılaşmanın moleküler mekanizmalarını ve Wilms tümör patogenezindeki düzensizliğini araştırmak için paha biçilmez bir araç haline getirmektedir.

Wilms1 ayrıca tümör ilerlemesinde rol oynayan kilit sinyal yollarının aktivasyon durumunu incelemek için de kullanılmıştır. Proteomik analizler, Wilms1 hücrelerinin EGFR ve PDGFRβ dahil olmak üzere çeşitli reseptör tirozin kinazların yanı sıra aşağı akış MAPK sinyal yolaklarının fosforilasyonunu ve aktivasyonunu sergilediğini göstermiştir. Bu bulgular, Wilms1 hücre hattının, bu yolakların kanser hücresi sağkalımı, proliferasyonu ve farklılaşmasındaki rolünü inceleyerek Wilms tümörü için hedefe yönelik terapötik yaklaşımların araştırılmasındaki önemini vurgulamaktadır.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın