Wilms10T

Wilms10T-cellinjen härrör från ett primärt Wilms-tumörprov från en patient med Wilms-tumör, ett pediatriskt nefroblastom. Denna cellinje kännetecknas av en homozygot deletion av WT1-genen, vilket leder till en fullständig förlust av WT1-funktionen, en kritisk gen som är involverad i njurutvecklingen och upprätthållandet av normal njurdifferentiering. Till skillnad från många andra cellinjer för Wilms-tumörer saknar Wilms10T uttryck av WT1-protein, vilket återspeglar de allvarliga genetiska förändringar som förekommer i denna tumörsubtyp. Dessutom uppvisar cellinjen Wilms10T förlust av heterozygoti (LOH) i kromosomområdet 11p15, som omfattar viktiga gener som IGF2, vilket ytterligare bidrar till dess tumörframkallande egenskaper.

Wilms10T-celler har en stabil normal karyotyp utan några större kromosomala omarrangemang förutom den specifika deletionen av WT1-regionen. Denna cellinje har använts i stor utsträckning för att studera effekterna av fullständig WT1-förlust på tumörbiologin, inklusive dess inverkan på cellproliferation, differentiering och respons på olika signalvägar. Cellerna har mesenkymala egenskaper och uttrycker markörer som vimentin, medan de saknar epiteliala markörer som cytokeratin, vilket tyder på deras stromala ursprung.

Betydande forskning har fokuserat på de signalvägar som är aktiva i Wilms10T-celler. Proteomiska studier har visat att dessa celler uppvisar aktivering av flera receptortyrosinkinaser (RTK), t.ex. IGF1R, PDGFRβ och AXL, som är kända för att driva tumörutvecklingen. Dessutom aktiveras nedströms signalvägar, inklusive MAPK- och PI3K/AKT-vägarna, i Wilms10T-celler, vilket bidrar till deras aggressiva tumörfenotyp. Den omfattande karakteriseringen av Wilms10T gör den till en värdefull modell för att undersöka den molekylära bakgrunden till Wilms tumör med fullständig WT1-förlust, samt för att utforska potentiella terapeutiska mål i denna aggressiva tumörundertyp.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring