Wilms11

Bunková línia Wilms11 bola odvodená z primárneho Wilmsovho nádoru (nefroblastómu) u detského pacienta. Na rozdiel od mnohých iných bunkových línií Wilmsovho nádoru sa Wilms11 vyznačuje prítomnosťou divokého typu WT1, čo znamená, že neobsahuje mutácie v géne WT1, ktoré sa zvyčajne spájajú s Wilmsovými nádormi vykazujúcimi agresívnejší alebo stromálny fenotyp. Nádor Wilms11 však vykazoval výraznú stromálnu diferenciáciu s veľkými oblasťami rabdomyomatóznej diferenciácie, čo svedčí o mezenchymálnych prvkoch v nádore. Prítomnosť divokého typu WT1 spolu so stromálnou diferenciáciou nádoru poskytuje jedinečný model na pochopenie biológie Wilmsovho nádoru v prípadoch, keď mutácie WT1 chýbajú.

Genetické štúdie Wilms11 ukázali, že táto bunková línia nesie nádorovo špecifickú mutáciu v CTNNB1, géne kódujúcom β-katenín, ktorý hrá kľúčovú úlohu v signálnej dráhe Wnt. V prípade Wilms11 táto mutácia ovplyvňuje serín 45, kľúčové fosforylačné miesto, ktoré sa podieľa na degradácii β-Cateninu. Mutácia CTNNB1 vedie k stabilizácii β-katenínu, čo vedie k jeho akumulácii a konštitutívnej aktivácii signálnej dráhy Wnt, ktorá je hnacou silou bunkovej proliferácie a tumorigenézy. Vďaka tomu je Wilms11 dôležitým modelom na štúdium vzájomného pôsobenia signalizácie Wnt a vývoja Wilmsovho nádoru, najmä v prípadoch, keď WT1 zostáva neporušený.

Proteomické analýzy Wilms11 odhalili aktiváciu niekoľkých receptorových tyrozínkináz (RTK) vrátane PDGFRβ a AXL, ktoré sa podieľajú na riadení rastu a prežívania nádorových buniek. V bunkách Wilms11 sú aktivované aj nadväzujúce signálne dráhy, ako napríklad MAPK a PI3K/AKT, čo prispieva k ich nádorovému správaniu. Schopnosť buniek Wilms11 podstupovať mezenchýmovú diferenciáciu, najmä rabdomyomatóznu diferenciáciu, zdôrazňuje ich potenciál ako modelu na štúdium mezenchýmových zložiek Wilmsovho nádoru. Celkovo slúži Wilms11 ako cenný nástroj na skúmanie molekulárnych mechanizmov, ktoré riadia Wilmsov tumorigenézu v neprítomnosti mutácií WT1, ale v kontexte aktivácie dráhy Wnt.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke