Wilms11

La lignée cellulaire Wilms11 a été dérivée d'une tumeur de Wilms primaire (néphroblastome) chez un patient pédiatrique. Contrairement à de nombreuses autres lignées cellulaires de tumeurs de Wilms, Wilms11 se caractérise par la présence de WT1 de type sauvage, c'est-à-dire qu'elle n'héberge pas de mutations dans le gène WT1, ce qui est généralement associé à des tumeurs de Wilms présentant des phénotypes plus agressifs ou stromaux. Cependant, la tumeur Wilms11 présentait une différenciation stromale significative, avec de larges zones de différenciation rhabdomyomateuse, indiquant la présence d'éléments mésenchymateux dans la tumeur. La présence de WT1 de type sauvage, associée à la différenciation stromale de la tumeur, fournit un modèle unique pour comprendre la biologie de la tumeur de Wilms dans les cas où les mutations de WT1 sont absentes.

Les études génétiques de Wilms11 ont montré que cette lignée cellulaire porte une mutation spécifique de la tumeur dans CTNNB1, le gène codant pour la β-Caténine, qui joue un rôle crucial dans la voie de signalisation Wnt. Dans le cas de Wilms11, cette mutation affecte la sérine 45, un site de phosphorylation clé impliqué dans la dégradation de la β-Caténine. La mutation CTNNB1 entraîne la stabilisation de la β-Caténine, ce qui conduit à son accumulation et à l'activation constitutive de la voie de signalisation Wnt, moteur de la prolifération cellulaire et de la tumorigenèse. Cela fait de Wilms11 un modèle important pour l'étude de l'interaction entre la signalisation Wnt et le développement des tumeurs de Wilms, en particulier dans les cas où WT1 reste intact.

Les analyses protéomiques de Wilms11 ont révélé l'activation de plusieurs récepteurs tyrosine kinases (RTK), dont le PDGFRβ et l'AXL, qui sont impliqués dans la croissance et la survie des cellules tumorales. Les voies de signalisation en aval, telles que les voies MAPK et PI3K/AKT, sont également activées dans les cellules Wilms11, contribuant à leur comportement tumorigène. La capacité des cellules Wilms11 à subir une différenciation mésenchymateuse, en particulier une différenciation rhabdomyomateuse, souligne leur potentiel en tant que modèle pour l'étude des composants mésenchymateux de la tumeur de Wilms. Dans l'ensemble, Wilms11 est un outil précieux pour étudier les mécanismes moléculaires qui conduisent à la tumorigenèse de Wilms en l'absence de mutations WT1 mais dans le contexte de l'activation de la voie Wnt.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie