Wilms11

Клетъчната линия Wilms11 е получена от първичен тумор на Wilms (нефробластом) при педиатричен пациент. За разлика от много други клетъчни линии на тумори на Wilms, Wilms11 се характеризира с наличието на див тип WT1, което означава, че не съдържа мутации в гена WT1, които обикновено се свързват с тумори на Wilms, проявяващи по-агресивни или стромални фенотипове. Въпреки това туморът Wilms11 показва значителна стромална диференциация с големи области на рабдомиоматозна диференциация, което показва мезенхимни елементи в тумора. Наличието на WT1 от див тип, съчетано със стромалната диференциация на тумора, предоставя уникален модел за разбиране на биологията на туморите на Wilms в случаите, когато липсват мутации на WT1.

Генетичните изследвания на Wilms11 показаха, че тази клетъчна линия е носител на специфична за тумора мутация в CTNNB1, гена, кодиращ β-Catenin, който играе ключова роля в сигналния път на Wnt. При Wilms11 тази мутация засяга серин 45, ключово място за фосфорилиране, което участва в разграждането на β-Catenin. Мутацията на CTNNB1 води до стабилизиране на β-Катенин, което води до неговото натрупване и конститутивно активиране на сигналния път на Wnt, който е двигател на клетъчната пролиферация и туморогенезата. Това прави Wilms11 важен модел за изучаване на взаимодействието между Wnt сигнализацията и развитието на тумора на Wilms, особено в случаите, когато WT1 остава непокътнат.

Протеомичните анализи на Wilms11 разкриха активирането на няколко рецепторни тирозинкинази (RTK), включително PDGFRβ и AXL, които участват в стимулирането на растежа и оцеляването на туморните клетки. Низходящите сигнални пътища, като MAPK и PI3K/AKT, също се активират в клетките Wilms11, допринасяйки за тяхното туморогенно поведение. Способността на клетките Wilms11 да се подлагат на мезенхимна диференциация, особено на рабдомиоматозна диференциация, подчертава потенциала им като модел за изучаване на мезенхимните компоненти на тумора на Wilms. Като цяло Wilms11 служи като ценен инструмент за изследване на молекулярните механизми, които стимулират туморогенезата на Wilms при липса на мутации на WT1, но в контекста на активиране на пътя на Wnt.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация