Wilms11

Wilms11細胞株は、小児患者の原発性ウィルムス腫瘍（腎芽腫）に由来する。他の多くのウィルムス腫瘍細胞株とは異なり、Wilms11は野生型WT1の存在によって特徴づけられる。つまり、WT1遺伝子に変異がないことを意味し、通常、より侵攻性の高い、あるいは間質性の表現型を示すウィルムス腫瘍と関連する。しかしながら、Wilms11腫瘍は、腫瘍内に間葉系要素があることを示す横紋筋腫分化の大きな領域を伴う、顕著な間質分化を示した。野生型WT1の存在は、腫瘍の間質分化と相まって、WT1変異がない場合のウィルムス腫瘍の生物学を理解するためのユニークなモデルを提供する。

Wilms11の遺伝学的研究から、この細胞株はWntシグナル伝達経路で重要な役割を果たすβ-カテニンをコードする遺伝子であるCTNNB1に腫瘍特異的変異を有していることが示された。Wilms11では、この変異はβ-カテニンの分解に関与する重要なリン酸化部位であるセリン45に影響を及ぼしている。CTNNB1変異は、β-カテニンの安定化をもたらし、その蓄積と、細胞増殖と腫瘍形成の原動力であるWntシグナル伝達経路の恒常的な活性化をもたらす。このことからWilms11は、Wntシグナル伝達とWilms腫瘍発生との間の相互作用を研究するための重要なモデルとなっている。

Wilms11のプロテオーム解析から、腫瘍細胞の増殖と生存に関与するPDGFRβやAXLを含むいくつかの受容体チロシンキナーゼ（RTK）の活性化が明らかになった。MAPK経路やPI3K/ACT経路などの下流のシグナル伝達経路もWilms11細胞で活性化され、腫瘍形成に寄与している。Wilms11細胞が間葉系分化、特に横紋筋腫系分化を起こす能力は、Wilms腫瘍の間葉系成分を研究するモデルとしての可能性を強調している。全体として、Wilms11は、WT1突然変異がないにもかかわらずWnt経路が活性化されている状況で、ウィルムス腫瘍の発生を促進する分子メカニズムを研究するための貴重なツールである。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。