Wilms10M

A Wilms10M sejtvonalat egy Wilms-tumoros (nefroblastómás) beteg metasztatikus tüdőcsomójából hozták létre. A Wilms10M sejtvonalra, akárcsak primer tumoros megfelelőjére, a Wilms10T-re, a WT1 gén homozigóta deléciója jellemző, ami a WT1 fehérje teljes hiányát eredményezi. A WT1 esszenciális a normális vesefejlődéshez, és deléciója agresszívabb tumoros viselkedéssel jár, különösen metasztatikus környezetben. Ezenkívül a Wilms10M sejtek heterozigozitásvesztést (LOH) mutatnak a 11p15 kromoszómarégióban, amely az IGF2 gént tartalmazza, ami tovább hozzájárul e sejtek rosszindulatú tulajdonságaihoz.

A Wilms10M sejtek stabil kariotípust tartanak fenn, amelyben a WT1 régió specifikus delécióján kívül nincsenek jelentősebb kromoszóma-átrendeződések. Ez a metasztatikus szövetből származó sejtvonal különösen értékes a Wilms-tumorban az áttétképzést irányító molekuláris mechanizmusok tanulmányozásához. A sejtek mesenchymális jellegzetességeket mutatnak, olyan markereket expresszálnak, mint a vimentin, miközben hiányoznak belőlük az olyan epithelialis markerek, mint a citokeratin, ami arra utal, hogy a tumor stromális komponenséből származnak.

A Wilms10M kutatásai az ezekben az áttétes sejtekben aktív jelátviteli útvonalakra összpontosítottak. A proteomikai elemzések számos receptor-tirozin-kináz (RTK) aktiválódását mutatták ki, köztük az IGF1R, PDGFRβ és AXL aktiválódását, amelyek részt vesznek a sejtek túlélésének, proliferációjának és metasztatikus potenciáljának elősegítésében. A downstream MAPK és PI3K/AKT jelátviteli útvonalak is aktiválódnak, amelyek kulcsszerepet játszanak a Wilms10M sejtek invazív és metasztatikus fenotípusának fenntartásában. Metasztatikus eredetét tekintve a Wilms10M alapvető modell a Wilms-tumor metasztázisának hátterében álló molekuláris események megértéséhez és az áttétes betegség elleni célzott terápiás stratégiák kifejlesztéséhez.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban