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RM-1
Gewebe
Prostata
Krankheit
Karzinom der Prostata der Maus
Synonyme
RM1

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RM-1

Cell line · Artikelnummer 305168

Die Zelllinie RM-1 ist ein fibroblastenähnliches Modell, das aus dem embryonalen Prostatagewebe von C57BL/6-Mausembryonen gewonnen wurde. Diese Zellen wurden aus 17 Tage alten …

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die RM-1-Zelllinie ist ein fibroblastenähnliches Modell, das aus dem embryonalen Prostatagewebe von C57BL/6-Mausembryonen gewonnen wird. Diese Zellen wurden aus 17 Tage alten Sinus urogenitalis Zellen isoliert und mit dem Zipras/myc9 Retrovirus infiziert, das die Onkogene v-Ha-Ras und v-Myc enthält. RM-1-Zellen weisen ein hohes tumorigenes Potenzial auf und bilden mit großer Häufigkeit schlecht differenzierte Prostatakarzinome der Maus.

RM-1-Zellen sind positiv für Cytokeratin 18 mRNA und immunreaktiv gegenüber Cytokeratin-spezifischem Antiserum, was auf epithelialen Ursprung hinweist. Sie zeigen eine signifikante mitogene Reaktion auf Testosteron, wobei die Zellzahl unter serumfreien Bedingungen etwa um das Zweifache ansteigt. Diese Zelllinie behält über mehrere Passagen hinweg stabile Androgenrezeptorzahlen und Bindungskinetiken bei, was sie zu einem wertvollen Modell für die Untersuchung der Androgenempfindlichkeit und des Fortschreitens von Prostatakrebs macht.

Gewebe
Prostata
Krankheit
Karzinom der Prostata der Maus
Synonyme
  • RM1

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This murine prostate carcinoma cell line (RM-1) contains the recombinant retrovirus Zipras/myc9 encoding v-Ha-Ras and v-Myc, supporting transformed growth and tumorigenicity. The inserts are stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
RM-1 (Cytion-Katalognummer 305168)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_B459

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Rasse / Unterart
C57BL/6
Alter des Spenders
17 fötale Tage