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RM-1
Tessuto
Prostata
Malattia
Carcinoma della ghiandola prostatica di topo
Sinonimi
RM1

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RM-1

Cell line · Codice prodotto 305168

La linea cellulare RM-1 è un modello di tipo fibroblastico derivato dal tessuto prostatico embrionale di embrioni di topo C57BL/6. Queste cellule sono state isolate da embrioni di 17 giorni...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare RM-1 è un modello simile a un fibroblasto derivato dal tessuto prostatico embrionale di embrioni di topo C57BL/6. Queste cellule sono state isolate da cellule del seno urogenitale di 17 giorni e infettate con il retrovirus Zipras/myc9, contenente gli oncogeni v-Ha-Ras e v-Myc. Le cellule RM-1 mostrano un elevato potenziale tumorigenico, formando con alta frequenza carcinomi prostatici di topo scarsamente differenziati.

Le cellule RM-1 sono positive per l'mRNA della citocheratina 18 e immunoreattive all'antisiero specifico per la citocheratina, il che indica un'origine epiteliale. Dimostrano una significativa risposta mitogena al testosterone, con un aumento di circa due volte del numero di cellule in condizioni di assenza di siero. Questa linea cellulare mantiene stabile il numero di recettori per gli androgeni e la cinetica di legame in più passaggi, rendendola un modello prezioso per lo studio della sensibilità agli androgeni e della progressione del cancro alla prostata.

Tessuto
Prostata
Malattia
Carcinoma della ghiandola prostatica di topo
Sinonimi
  • RM1

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This murine prostate carcinoma cell line (RM-1) contains the recombinant retrovirus Zipras/myc9 encoding v-Ha-Ras and v-Myc, supporting transformed growth and tumorigenicity. The inserts are stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
RM-1 (numero di catalogo Cytion 305168)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_B459

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Razza / sottospecie
C57BL/6
Età dei donatori
17 giorni fetali