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B-CPAP
Gewebe
Schilddrüse
Krankheit
Schilddrüsenkarzinom
Synonyme
BC-PAP, BCPAP

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B-CPAP

Cell line · Artikelnummer 305081

B-CPAP is a human papillary thyroid carcinoma cell line that was established from the primary tumor of a 74-year-old woman. The cell line exhibits epithel...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

B-CPAP ist eine humane papilläre Schilddrüsenkarzinom-Zelllinie, die aus dem Primärtumor einer 74-jährigen Frau gewonnen wurde. Die Zelllinie weist eine epithelähnliche Morphologie auf und wird häufig in der Forschung zur Untersuchung der Biologie von Schilddrüsenkrebs, einschließlich der Mechanismen der Tumorentstehung und Metastasierung, eingesetzt. B-CPAP-Zellen weisen eine BRAF-V600E-Mutation auf, eine häufige genetische Veränderung, die mit aggressivem Schilddrüsenkrebs assoziiert ist und als wichtiges Modell für die Untersuchung von BRAF-Inhibitoren als therapeutische Wirkstoffe dient.

Neben der BRAF-Mutation exprimieren B-CPAP-Zellen schilddrüsenspezifische Marker wie Thyreoglobulin und den Rezeptor für das schilddrüsenstimulierende Hormon, was sie zu einem wertvollen Modell für die Untersuchung der Schilddrüsenfunktion und -pathologie macht. Sie wurden ausgiebig in Studien verwendet, in denen die Signalwege untersucht wurden, die an der Progression von Schilddrüsenkrebs beteiligt sind, einschließlich der Aktivierung des MAPK/ERK-Signalwegs. Diese Zellen werden auch in Studien zur Medikamentenresistenz und Apoptose eingesetzt, um Einblicke in die Mechanismen zu gewinnen, die dem Versagen von Schilddrüsenkrebsbehandlungen zugrunde liegen könnten.

Gewebe
Schilddrüse
Krankheit
Schilddrüsenkarzinom
Synonyme
  • BC-PAP
  • BCPAP

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Verdopplungszeit
30 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
B-CPAP (Cytion Katalognummer 305081)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0153

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
76 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch