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IEC-6
Gewebe
Dünndarm
Synonyme
IEC 6, IEC6, Intestinal Epithelioid Cell line No. 6

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IEC-6

Cell line · Artikelnummer 302149

IEC-6 is an epithelial cell line derived from the rat small intestine, specifically the crypt cells. These cells are non-tumorigenic and have been instrum...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

IEC-6 ist eine Epithelzelllinie, die aus dem Dünndarm der Ratte stammt, insbesondere aus den Kryptenzellen. Diese Zellen sind nicht tumorbildend und haben bei Studien zur Funktion des Darmepithels, zur Differenzierung und zu den Mechanismen von Darmerkrankungen eine wichtige Rolle gespielt. IEC-6-Zellen weisen die Eigenschaften normaler Darmepithelzellen auf, einschließlich der Fähigkeit zur Differenzierung und Aufrechterhaltung der Kontakthemmung. Diese Zelllinie ist besonders wertvoll für die Forschung im Bereich der gastrointestinalen Biologie, einschließlich der Untersuchung der Auswirkungen von Wachstumsfaktoren, Zytokinen und verschiedenen pharmakologischen Wirkstoffen auf das Darmepithel.

IEC-6-Zellen werden häufig für Untersuchungen der zellulären Prozesse verwendet, die an der Regeneration und Reparatur des Darms beteiligt sind, was sie für die Erforschung von Magen-Darm-Pathologien wie entzündlichen Darmerkrankungen und Krebs unverzichtbar macht. Die Zellen reagieren empfindlich auf die Wachstumshemmung durch den transformierenden Wachstumsfaktor-beta (TGF-β), der häufig zur Untersuchung der Signalwege verwendet wird, die an der Proliferation und Differenzierung von Epithelzellen beteiligt sind. Darüber hinaus werden IEC-6-Zellen in der Forschung im Zusammenhang mit der Nährstoffabsorption und der Barrierefunktion verwendet, was dazu beiträgt, die Rolle des Darmepithels bei der Aufrechterhaltung der Darmhomöostase zu klären.

Gewebe
Dünndarm
Anwendungen
Transfektion. Studien zur Genexpression
Synonyme
  • IEC 6
  • IEC6
  • Intestinal Epithelioid Cell line No. 6

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Epithelzelle

04Bezeichner

Quellenangabe
IEC-6 (Cytion Katalognummer 302149)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_0343

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Rasse / Unterart
Charles River Sprague Dawley (CD(SD))
Alter des Spenders
18-24 Tage