Mine otse sisu juurde
IEC-6
Kude
Peensool
Sünonüümid
IEC 6, IEC6, Intestinal Epithelioid Cell line No. 6

Dokumendid

IEC-6

Cell line · Toote number 302149

IEC-6 is an epithelial cell line derived from the rat small intestine, specifically the crypt cells. These cells are non-tumorigenic and have been instrum...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

IEC-6 on roti peensoolest, täpsemalt krüptirakkudest saadud epiteelirakuliin. Need rakud ei ole kasvajalised ja on olnud olulised soole epiteeli funktsiooni, diferentseerumise ja soole haiguste aluseks olevate mehhanismide uurimisel. IEC-6 rakud säilitavad normaalsete soole epiteelirakkude omadused, sealhulgas võime diferentseeruda ja säilitada kontaktide inhibeerimine. See rakuliin on eriti väärtuslik seedetrakti bioloogiat käsitlevate uuringute jaoks, sealhulgas kasvufaktorite, tsütokiinide ja mitmesuguste farmakoloogiliste ainete mõju uurimiseks soole epiteelile.

IEC-6 rakke kasutatakse laialdaselt soole regenereerimise ja parandamise rakuprotsesside uurimisel, mistõttu on need olulised seedetrakti patoloogiate, näiteks põletikulise soolehaiguse (IBD) ja vähi uurimisel. Need rakud on tundlikud kasvu inhibeerimise suhtes transformeeriva kasvufaktori beeta (TGF-β) poolt, mida tavaliselt kasutatakse epiteelirakkude proliferatsiooni ja diferentseerumise signaaliradade uurimiseks. Lisaks kasutatakse IEC-6 rakke toitainete imendumise ja barjääri funktsiooniga seotud uuringutes, aidates selgitada soole epiteeli rolli soole homöostaasi säilitamisel.

Kude
Peensool
Rakendused
Transfektsioon. Geeni ekspressiooni uuringud
Sünonüümid
  • IEC 6
  • IEC6
  • Intestinal Epithelioid Cell line No. 6

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakk

04Tunnused

Viide
IEC-6 (Cytioni katalooginumber 302149)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_0343

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
Charles River Sprague Dawley (CD(SD))
Doonori vanus
18-24 päeva