Pāriet uz saturu
IEC-6
Audums
Tievās zarnas
Sinonīmi
IEC 6, IEC6, Intestinal Epithelioid Cell line No. 6

Dokumenti

IEC-6

Cell line · Preces numurs 302149

IEC-6 is an epithelial cell line derived from the rat small intestine, specifically the crypt cells. These cells are non-tumorigenic and have been instrum...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

IEC-6 ir epitēlija šūnu līnija, kas iegūta no žurkas tievās zarnas, īpaši no kriptas šūnām. Šīs šūnas nav tumorogēnas, un tās ir bijušas noderīgas pētījumos, kas saistīti ar zarnu epitēlija funkciju, diferenciāciju un zarnu slimību pamatmehānismiem. IEC-6 šūnas saglabā normālu zarnu epitēlija šūnu īpašības, tostarp spēju diferencēties un saglabāt kontakta inhibīciju. Šī šūnu līnija ir īpaši vērtīga pētījumiem, kas vērsti uz kuņģa un zarnu trakta bioloģiju, tostarp pētījumiem par augšanas faktoru, citokīnu un dažādu farmakoloģisko līdzekļu ietekmi uz zarnu epitēliju.

IEC-6 šūnas plaši izmanto, pētot zarnu reģenerācijā un atjaunošanā iesaistītos šūnu procesus, tāpēc tās ir ļoti svarīgas, pētot kuņģa un zarnu trakta patoloģijas, piemēram, zarnu iekaisuma slimības (IBD) un vēzi. Šūnas ir jutīgas pret augšanas inhibīciju ar transformējošo augšanas faktoru beta (TGF-β), ko parasti izmanto, lai pētītu epitēlija šūnu proliferācijā un diferenciācijā iesaistītos signālu ceļus. Turklāt IEC-6 šūnas izmanto pētījumos, kas saistīti ar barības vielu uzsūkšanos un barjeras funkciju, palīdzot noskaidrot zarnu epitēlija lomu zarnu homeostāzes uzturēšanā.

Audums
Tievās zarnas
Pieteikumi
Transfekcija. Gēnu ekspresijas pētījumi
Sinonīmi
  • IEC 6
  • IEC6
  • Intestinal Epithelioid Cell line No. 6

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija šūna

04Identifikatori

Atsauce
IEC-6 (Cytion kataloga numurs 302149)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_0343

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Charles River Sprague Dawley (CD(SD))
Donora vecums
18-24 dienas