Siirry sisältöön
IEC-6
Kudos
Ohutsuoli
Synonyymit
IEC 6, IEC6, Intestinal Epithelioid Cell line No. 6

Asiakirjat

IEC-6

Cell line · Tuotenumero 302149

IEC-6 is an epithelial cell line derived from the rat small intestine, specifically the crypt cells. These cells are non-tumorigenic and have been instrum...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

IEC-6 on epiteelisolulinja, joka on peräisin rotan ohutsuolesta, erityisesti kryptasoluista. Nämä solut eivät ole kasvaimia aiheuttavia, ja ne ovat olleet keskeisessä asemassa tutkimuksissa, jotka liittyvät suolen epiteelin toimintaan, erilaistumiseen ja suolistosairauksien taustalla oleviin mekanismeihin. IEC-6-solut säilyttävät normaalien suolen epiteelisolujen ominaisuudet, mukaan lukien kyvyn erilaistua ja ylläpitää kontaktin estoa. Tämä solulinja on erityisen arvokas ruoansulatuskanavan biologiaan keskittyvässä tutkimuksessa, mukaan lukien kasvutekijöiden, sytokiinien ja erilaisten farmakologisten aineiden vaikutusten tutkiminen suoliston epiteeliin.

IEC-6-soluja käytetään laajalti suolen uudistumiseen ja korjautumiseen liittyvien soluprosessien tutkimisessa, minkä vuoksi ne ovat välttämättömiä ruoansulatuskanavan patologioiden, kuten tulehduksellisten suolistosairauksien (IBD) ja syövän, tutkimuksessa. Solut ovat herkkiä transformoivan kasvutekijä-beetan (TGF-β) aiheuttamalle kasvun estolle, jota käytetään yleisesti epiteelisolujen proliferaatioon ja erilaistumiseen liittyvien signaalireittien tutkimiseen. Lisäksi IEC-6-soluja hyödynnetään ravintoaineiden imeytymiseen ja esteen toimintaan liittyvässä tutkimuksessa, mikä auttaa selvittämään suolen epiteelin roolia suoliston homeostaasin ylläpitämisessä.

Kudos
Ohutsuoli
Sovellukset
Transfektio. Geeniekspressiotutkimukset
Synonyymit
  • IEC 6
  • IEC6
  • Intestinal Epithelioid Cell line No. 6

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteelisolu

04Tunnisteet

Lähdeviite
IEC-6 (Cytionin luettelonumero 302149)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_0343

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Charles River Sprague Dawley (CD(SD))
Luovuttajan ikä
18-24 päivää