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MSC-P5
Gewebe
Haut
Synonyme
MSCP 5, MSCP-5, MSCP5

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MSC-P5

Cell line · Artikelnummer 400294

The MSCP5 cell line, derived from murine skin keratinocytes, represents a vital tool for research in dermatology and cellular biology. This line is charac...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie MSCP5, die aus Keratinozyten der Maushaut gewonnen wird, ist ein wichtiges Instrument für die Forschung in der Dermatologie und Zellbiologie. Diese Linie zeichnet sich durch ihre robuste Expression von Prostaglandin-H-Synthase 2 (PGHS-2) aus, auch bekannt als Cyclooxygenase-2 (COX-2), ein Enzym, das eine entscheidende Rolle im Prostaglandin-Biosyntheseweg spielt, der eine zentrale Rolle bei Entzündungs- und Wundheilungsprozessen spielt. Insbesondere zeigen MSCP5-Zellen eine ausgeprägte Induktion der PGHS-2-Expression bei Stimulation mit Phorbol 12-Myristat 13-Acetat (PMA), was die zelluläre Reaktion auf entzündliche Bedingungen und hyperproliferative Zustände der Epidermis nachahmt.

Diese Zelllinie bietet ein einzigartiges Modell für die Untersuchung der Regulation der COX-2-Expression und ihrer Auswirkungen auf die Pathophysiologie der Haut, einschließlich Entzündungen und Karzinogenese. Die PMA-induzierte Hochregulierung von PGHS-2 in MSCP5-Zellen ist ein wertvolles System zur Untersuchung der molekularen Mechanismen der Reaktion von Keratinozyten auf Entzündungsreize, der Rolle von Prostaglandinen bei Hautkrankheiten und der möglichen therapeutischen Ausrichtung von COX-2 bei dermatologischen Erkrankungen.

Gewebe
Haut
Synonyme
  • MSCP 5
  • MSCP-5
  • MSCP5

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Zelltyp
Keratinozyten

04Bezeichner

Quellenangabe
MSC-P5 (Cytion-Katalognummer 400294)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_5843

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Rasse / Unterart
C3H