29 Oct 2026
Kryokonservierung von fluoreszierenden Zellen
Kryokonservierung von fluoreszierenden Zellen
Die Konservierung fluoreszierender Zellen erfordert eine sorgfältige Berücksichtigung sowohl des Kryokonservierungsprozesses als auch der Aufrechterhaltung der Stabilität des fluoreszierenden Proteins. Bei Cytion haben wir optimierte Protokolle entwickelt, um sicherzustellen, dass Ihre fluoreszenzmarkierten Zellen nach dem Auftauen sowohl ihre Lebensfähigkeit als auch ihre Fluoreszenzintensität behalten.
Das Wichtigste in Kürze
- Fluoreszierende Proteine bleiben bei ordnungsgemäßer Kryokonservierung stabil
- Die optimale Zusammensetzung des Einfriermediums ist entscheidend für die Erhaltung der Fluoreszenz
- Kontrolliertes Einfrieren verbessert den Erhalt der Fluoreszenz nach dem Auftauen
- Für GFP- und RFP-exprimierende Zellen gelten besondere Überlegungen zur Handhabung
- Erholungszeiten nach dem Auftauen beeinflussen die Fluoreszenzintensität
Stabilität von fluoreszierenden Proteinen während der Kryokonservierung
Fluoreszierende Proteine, insbesondere GFP und seine Varianten, zeigen bei ordnungsgemäßer Kryokonservierung eine bemerkenswerte Stabilität. Unsere Forschung bei Cytion, insbesondere mit Zelllinien wie HK EGFP-alpha-tubulin/H2B-mCherry Cells und HK EGFP-H2B Cells, zeigt, dass fluoreszierende Proteine ihre strukturelle Integrität behalten, wenn sie unter optimalen Bedingungen eingefroren werden. Der Schlüssel zur erfolgreichen Konservierung liegt in der Verwendung geeigneter Kryoprotektionsmittel und der Einhaltung standardisierter Protokolle. Wir empfehlen die Verwendung des Gefriermediums CM-1, das speziell für den Schutz der Zellstrukturen und die Aufrechterhaltung der Proteinstabilität während des Einfriervorgangs entwickelt wurde. Bei Anwendung geeigneter Kryokonservierungstechniken bleibt die Fluoreszenzproteinexpression nach dem Auftauen in der Regel bei über 90 % der Werte vor dem Einfrieren.
Die Bedeutung der Zusammensetzung des Einfriermediums für die Erhaltung der Fluoreszenz
Die Zusammensetzung Ihres Einfriermediums spielt eine entscheidende Rolle für die Erhaltung der Lebensfähigkeit und der Fluoreszenzintensität der Zellen. Bei Cytion haben wir spezielle Kryokonservierungsmedien entwickelt, die den besonderen Herausforderungen der Konservierung von Fluoreszenzzellen gerecht werden. Unser serumfreies Einfriermedium CM-ACF wurde speziell für den Schutz fluoreszierender Proteine während des Einfriervorgangs optimiert. Für empfindliche fluoreszierende Zelllinien wie HK EGFP-Cap-D2 Cells empfehlen wir unser Freeze Medium CM-1 - 100 ml, das optimierte Konzentrationen von Kryoprotektoren enthält, die die Bildung von Eiskristallen verhindern und gleichzeitig die Stabilität der Fluorophore erhalten. Die ausgewogene Osmolarität und die Schutzmittel des Mediums sorgen dafür, dass die fluoreszierenden Proteine während des gesamten Einfrier- und Auftauvorgangs ihre native Konformation beibehalten, was zu konsistenten Fluoreszenzsignalen nach dem Auftauen führt.
Kontrolliertes Einfrieren: Wesentlich für die Erhaltung der Fluoreszenz
Kontrolliertes Einfrieren ist entscheidend für die Erhaltung der Integrität fluoreszierender Proteine während der Kryokonservierung. Unsere Forschung bei Cytion mit fluoreszierenden Zelllinien wie NRK-EGFP-H2B-Zellen und U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP-Klon Nr. 33-Zellen hat gezeigt, dass eine Kühlrate von -1°C pro Minute optimal ist, um die Fluoreszenzintensität zu erhalten. Dieser kontrollierte Ansatz, kombiniert mit unserem Gefriermedium CM-ACF - serumfrei - 100 ml, minimiert die Bildung von schädlichen Eiskristallen, die die Proteinstruktur beeinträchtigen können. Wir empfehlen die Verwendung eines Isopropanol-Gefrierbehälters oder eines programmierbaren Gefriergeräts, um gleichmäßige Kühlraten zu erzielen. Diese Methode hat sich als besonders effektiv erwiesen, um komplexe fluoreszierende Proteinkonfigurationen zu erhalten, wie sie in unseren HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry-Zellen zu finden sind.