Μετάβαση στο περιεχόμενο
ATDC5
Ιστός
Έμβρυο
Ασθένεια
Τερατοκαρκίνωμα
Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (προέρχεται από εμβρυϊκό τερατοκαρκίνωμα ποντικού· μη μεταστατικό μοντέλο)
Συνώνυμα
ATDC-5

Έγγραφα

ATDC5

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305427

ATDC5 is a murine chondrogenic cell line derived from mouse teratocarcinoma cells and is widely used as an in vitro model for studying chondrogenesis and ...

€650.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Το ATDC5 είναι μια χονδρογενής κυτταρική σειρά ποντικού που προέρχεται από τερατοκαρκινωματικά κύτταρα ποντικού και χρησιμοποιείται ευρέως ως in vitro μοντέλο για τη μελέτη της χονδρογένεσης και της ανάπτυξης του χόνδρου. Αυτή η κυτταρική σειρά υφίσταται διαδοχική χονδρογονική διαφοροποίηση, μιμούμενη in vivo διεργασίες όπως η κυτταρική συμπύκνωση, η έκφραση πρώιμων χονδροκυτταρικών δεικτών όπως το κολλαγόνο τύπου ΙΙ και η αγρεκάνη, και η μετάβαση σε υπερτροφικά χονδροκύτταρα, που χαρακτηρίζεται από έκφραση κολλαγόνου τύπου Χ και ανοργανοποίηση της μήτρας. Λόγω της ικανότητάς του να πολλαπλασιάζεται και να διαφοροποιείται αποτελεσματικά, το ATDC5 χρησιμεύει ως πολύτιμο μοντέλο για τη διερεύνηση μοριακών μηχανισμών που σχετίζονται με τη σκελετική ανάπτυξη, ιδίως την ενδοχόνδρια οστεοποίηση.

Τα κύτταρα ATDC5 έχουν χρησιμοποιηθεί εκτενώς για τη μελέτη της επίδρασης διαφόρων αυξητικών παραγόντων, ορμονών και μεταγραφικών παραγόντων στη χονδρογένεση. Για παράδειγμα, ο μετασχηματιστικός αυξητικός παράγοντας-β (TGF-β) έχει αποδειχθεί ότι προάγει την πρώιμη χονδρογενή διαφοροποίηση μέσω της διαμόρφωσης της έκφρασης συστατικών της εξωκυτταρικής μήτρας, όπως η φιμπρονεκτίνη. Ομοίως, οι μορφογενετικές πρωτεΐνες των οστών (BMPs), ιδίως οι BMP-2, -4 και -7, διαδραματίζουν κρίσιμο ρόλο στην προώθηση διαφόρων σταδίων της διαφοροποίησης των χονδροκυττάρων στο ATDC5. Επιπλέον, η ενεργοποίηση των διαύλων μεταβατικού δυναμικού υποδοχέα vanilloid 4 (TRPV4) σε αυτά τα κύτταρα, σε συνδυασμό με την υαλουρονάνη, έχει αποδειχθεί ότι ενισχύει την έκφραση βασικών χονδρογενετικών δεικτών, όπως SOX9 και Aggrecan, υποστηρίζοντας περαιτέρω τη χρησιμότητά τους σε μελέτες μηχανικής ιστών χόνδρου.

Αυτή η κυτταρική σειρά έχει επίσης συμβάλει στην έρευνα πρωτεωμικής, δείχνοντας ότι τα κύτταρα ATDC5 μπορούν να συνθέσουν κύρια συστατικά της εξωκυτταρικής μήτρας (ECM) του χόνδρου, όπως η αγρεκάνη και το κολλαγόνο τύπου ΙΙ, μαζί με τις κατάλληλες μετα-μεταφραστικές τροποποιήσεις που απαιτούνται για τη λειτουργία του χόνδρου. Η ικανότητά του να αναπαράγει κρίσιμα γεγονότα βιοσύνθεσης της ECM καθιστά το ATDC5 ένα απαραίτητο μοντέλο για τη μελέτη του σχηματισμού του χόνδρου και των σχετικών παθολογιών.

Ιστός
Έμβρυο
Ασθένεια
Τερατοκαρκίνωμα
Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (προέρχεται από εμβρυϊκό τερατοκαρκίνωμα ποντικού· μη μεταστατικό μοντέλο)
Εφαρμογές
Έρευνα στη χονδρογένεση· ανάπτυξη χόνδρου και ενδοχόνδρια οστεοποίηση· διαφοροποίηση χονδροκυττάρων (έκφραση κολλαγόνου τύπου II, αγγρεκάνης, SOX9)· Σηματοδότηση BMP-2/-4/-7 και TGF-β στα χονδροκύτταρα· μοντελοποίηση της οστεοαρθρίτιδας· μηχανική ιστών χόνδρου· βιοσύνθεση πρωτεογλυκανών· βιολογία των διαύλων TRPV4 στον χόνδρο
Συνώνυμα
  • ATDC-5

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
Χωρίς ΓΤΟ
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
No genetic modification; wildtype murine teratocarcinoma-derived chondrogenic cell line
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Πολυγωνικό
Τύπος κυττάρου
Προδρόμια κύτταρα χονδροκυττάρων

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
ATDC5 (αριθμός καταλόγου Cytion 305427)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_0225

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 5% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Για συνήθη καλλιέργεια προσκολλημένων κυττάρων: Αναρροφήστε το παλιό μέσο καλλιέργειας από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS για να απομακρύνετε τυχόν εναπομείναν μέσο. Αφού αναρροφήσετε το PBS, προσθέστε τον κατάλληλο όγκο διαλύματος Accutase ανάλογα με το μέγεθος του δοχείου καλλιέργειας (π.χ. 1 ml για φιάλη T25, 3 ml για φιάλη T75) και επωάστε σε θερμοκρασία δωματίου ή 37°C για 5-10 λεπτά ή μέχρι να αποκολληθούν τα κύτταρα. Παρακολουθήστε την αποκόλληση στο μικροσκόπιο και χτυπήστε απαλά το δοχείο εάν είναι απαραίτητο για να απελευθερώσετε τα κύτταρα. Αφού αποκολληθούν, προσθέστε πλήρες μέσο για να αδρανοποιήσετε την Accutase, ανασυσσωματώστε απαλά τα κύτταρα και μεταφέρετε μια εκατοστιαία ποσότητα του εναιωρήματος των κυττάρων σε ένα νέο δοχείο καλλιέργειας που περιέχει φρέσκο μέσο. Τοποθετήστε το δοχείο σε επωαστήρα ρυθμισμένο στους 37°C με 5%CO2 και αλλάζετε το μέσο κάθε 2-3 ημέρες.
Πυκνότητα σποράς
2 x 104 κύτταρα/cm2
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Φυλή / υποείδος
129
Ηλικία δωρητή
Έμβρυο