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MARC-145
Pañuelo de papel
Riñón embrionario
Sinónimos
Marc-145, MARC 145, Marc 145, MARC145, Marc145, Meat Animal Research Center-145

Documentos

MARC-145

Cell line · Número de producto 305006

The MARC-145 cell line is a monkey kidney epithelial cell line derived from the African green monkey (Cercopithecus aethiops). This cell line is particula...

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01Información general

Descripción

La línea celular MARC-145 es una línea celular epitelial de riñón de mono derivada del mono verde africano (Cercopithecus aethiops). Esta línea celular es particularmente notable por su uso en virología, especialmente en la propagación del virus del síndrome respiratorio y reproductivo porcino (PRRSV), un patógeno importante en la industria porcina. Las células MARC-145 han sido fundamentales en el estudio del PRRSV debido a su alta susceptibilidad al virus, lo que las convierte en una valiosa herramienta para el aislamiento viral, la propagación y el desarrollo de vacunas.

Las células MARC-145 se caracterizan por su morfología epitelial y su robusto crecimiento in vitro, lo que facilita la producción a gran escala del PRRSV con fines de investigación. Además, se han utilizado para explorar los mecanismos de la infección por PRRSV, incluyendo la entrada del virus, la replicación y las interacciones hospedador-patógeno. Esta línea celular también se ha utilizado en el desarrollo y prueba de compuestos antivirales y vacunas contra el PRRSV, contribuyendo significativamente a los esfuerzos dirigidos a controlar esta enfermedad de importancia económica en cerdos.

Pañuelo de papel
Riñón embrionario
Sinónimos
  • Marc-145
  • MARC 145
  • Marc 145
  • MARC145
  • Marc145
  • Meat Animal Research Center-145

02Clasificación

Organismo
Mono vervet
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Epitelial

04Identificadores

Referencia
MARC-145 (número de catálogo de Cytion 305006)
N.º de identificación fiscal del NCBI
60710
Cellosaurus
CVCL_4540

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
Feto