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MARC-145
Gewebe
Embryonale Niere
Synonyme
Marc-145, MARC 145, Marc 145, MARC145, Marc145, Meat Animal Research Center-145

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MARC-145

Cell line · Artikelnummer 305006

The MARC-145 cell line is a monkey kidney epithelial cell line derived from the African green monkey (Cercopithecus aethiops). This cell line is particula...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie MARC-145 ist eine Epithelzelllinie der Affenniere, die vom afrikanischen Grünen Affen (Cercopithecus aethiops) stammt. Diese Zelllinie ist vor allem für ihre Verwendung in der Virologie bekannt, insbesondere für die Vermehrung des Virus des Porzinen Reproduktiven und Respiratorischen Syndroms (PRRSV), einem bedeutenden Krankheitserreger in der Schweineindustrie. MARC-145-Zellen haben sich bei der Untersuchung von PRRSV aufgrund ihrer hohen Anfälligkeit für das Virus als wertvolles Instrument für die Virusisolierung, Vermehrung und Impfstoffentwicklung erwiesen.

MARC-145-Zellen zeichnen sich durch ihre epitheliale Morphologie und ihr robustes Wachstum in vitro aus, was die Produktion von PRRSV in großem Maßstab zu Forschungszwecken erleichtert. Darüber hinaus wurden sie zur Erforschung der Mechanismen der PRRSV-Infektion, einschließlich des Viruseintritts, der Replikation und der Wirt-Pathogen-Interaktionen, verwendet. Diese Zelllinie wurde auch für die Entwicklung und Erprobung antiviraler Wirkstoffe und PRRSV-Impfstoffe verwendet und leistete damit einen wichtigen Beitrag zur Bekämpfung dieser wirtschaftlich wichtigen Schweinekrankheit.

Gewebe
Embryonale Niere
Synonyme
  • Marc-145
  • MARC 145
  • Marc 145
  • MARC145
  • Marc145
  • Meat Animal Research Center-145

02Klassifizierung

Organismus
Grünlangaffe
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
MARC-145 (Cytion-Katalognummer 305006)
NCBI-Steuer-ID
60710
Cellosaurus
CVCL_4540

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
Fötus