Siirry sisältöön
MARC-145
Kudos
Alkion munuainen
Synonyymit
Marc-145, MARC 145, Marc 145, MARC145, Marc145, Meat Animal Research Center-145

Asiakirjat

MARC-145

Cell line · Tuotenumero 305006

The MARC-145 cell line is a monkey kidney epithelial cell line derived from the African green monkey (Cercopithecus aethiops). This cell line is particula...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MARC-145-solulinja on afrikkalaisesta vihreästä apinasta (Cercopithecus aethiops) peräisin oleva apinan munuaisten epiteelisolulinja. Tämä solulinja on erityisen merkittävä sen käytöstä virologiassa, erityisesti sikojen lisääntymis- ja hengitystieoireyhtymäviruksen (PRRSV), joka on merkittävä patogeeni sikateollisuudessa, levittämisessä. MARC-145-solut ovat olleet tärkeitä PRRSV:n tutkimuksessa, koska ne ovat erittäin herkkiä virukselle, mikä tekee niistä arvokkaan välineen viruksen eristämiseen, lisäämiseen ja rokotteiden kehittämiseen.

MARC-145-soluille on ominaista niiden epiteelimorfologia ja vankka kasvu in vitro, mikä helpottaa PRRSV:n laajamittaista tuotantoa tutkimustarkoituksiin. Lisäksi niitä on käytetty PRRSV-infektion mekanismien tutkimiseen, mukaan lukien viruksen pääsy, replikaatio ja isännän ja patogeenin vuorovaikutukset. Tätä solulinjaa on hyödynnetty myös viruslääkkeiden ja PRRSV-rokotteiden kehittämisessä ja testaamisessa, mikä on edistänyt merkittävästi tämän taloudellisesti merkittävän sikojen taudin torjuntaa.

Kudos
Alkion munuainen
Synonyymit
  • Marc-145
  • MARC 145
  • Marc 145
  • MARC145
  • Marc145
  • Meat Animal Research Center-145

02Luokittelu

Organismi
Vervet-apina
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
MARC-145 (Cytionin luettelonumero 305006)
NCBI-verotunnus
60710
Cellosaurus
CVCL_4540

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Sikiö