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MARC-145
Tessuto
Rene embrionale
Sinonimi
Marc-145, MARC 145, Marc 145, MARC145, Marc145, Meat Animal Research Center-145

Documenti

MARC-145

Cell line · Codice prodotto 305006

The MARC-145 cell line is a monkey kidney epithelial cell line derived from the African green monkey (Cercopithecus aethiops). This cell line is particula...

€800.00IVA e spese di spedizione escluse
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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare MARC-145 è una linea cellulare epiteliale di rene di scimmia derivata dalla scimmia verde africana (Cercopithecus aethiops). Questa linea cellulare è particolarmente nota per il suo uso in virologia, soprattutto nella propagazione del virus della sindrome riproduttiva e respiratoria dei suini (PRRSV), un importante agente patogeno nell'industria suina. Le cellule MARC-145 sono state fondamentali per lo studio del PRRSV grazie alla loro elevata suscettibilità al virus, che le rende uno strumento prezioso per l'isolamento virale, la propagazione e lo sviluppo di vaccini.

Le cellule MARC-145 sono caratterizzate da una morfologia epiteliale e da una crescita robusta in vitro, che facilita la produzione su larga scala di PRRSV a scopo di ricerca. Inoltre, sono state utilizzate per esplorare i meccanismi dell'infezione da PRRSV, tra cui l'ingresso del virus, la replicazione e le interazioni ospite-patogeno. Questa linea cellulare è stata utilizzata anche per lo sviluppo e la sperimentazione di composti antivirali e di vaccini contro il PRRSV, contribuendo in modo significativo agli sforzi volti a controllare questa malattia di importanza economica nei suini.

Tessuto
Rene embrionale
Sinonimi
  • Marc-145
  • MARC 145
  • Marc 145
  • MARC145
  • Marc145
  • Meat Animal Research Center-145

02Classificazione

Organismo
Scimmia vervet
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MARC-145 (numero di catalogo Cytion 305006)
Codice fiscale NCBI
60710
Cellosaurus
CVCL_4540

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
Feto