Mine otse sisu juurde
Capan-2 rakud
Kude
Pankreas
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
CaPan-2, CAPAN-2, Capan 2, CAPAN 2, Capan2, CAPAN2

Dokumendid

Capan-2 rakud

Cell line · Toote number 300144

Capan-2 rakuliin on inimese pankrease adenokartsinoomi rakuliin, mis eraldati esmakordselt 56-aastase kaukaasia päritolu mehe pankrease kasvajakoest. See...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Varud on väikesed
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Capan-2 rakuliin on inimese kõhunäärme adenokartsinoomi rakuliin, mis isoleeriti esmakordselt 56-aastase kaukaasia mehe kõhunäärmekasvaja koest. See on saadud metastaatilisest kohast maksas, mis näitab, et see pärineb sekundaarsest kasvajast, mis muudab selle eriti väärtuslikuks metastaatiliste protsesside ja kõhunäärmevähi bioloogia uurimisel. Rakkudel on epiteliaalne morfoloogia ja neid on laialdaselt kasutatud kõhunäärmevähi, ravimresistentsuse ja kasvajate bioloogia uurimiseks.

On teada, et Capan-2 rakud ekspresseerivad kõhunäärmevähi puhul levinud mutatsiooni Kirsten rotisarkoomi viirusliku onkogeeni homoloogi (KRAS) mutatsioonivormi, mis muudab need rakud tugevaks mudeliks KRAS-juhitava tuumorigeneesi uurimiseks. Lisaks sellele iseloomustab neid kasvaja supressorgeeni p53 mutatsioonide ekspressioon ja neil on täheldatud kromosoomi ebastabiilsust, mis on vähi progresseerumise ja ravivastuse seisukohalt olulised omadused. Seda rakuliini on kasutatud paljudes uuringutes, sealhulgas kemoteraapia tõhususe hindamiseks, vähi progresseerumise molekulaarradade uurimiseks ja sihipärase ravi strateegiate väljatöötamiseks.

Kude
Pankreas
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
  • CaPan-2
  • CAPAN-2
  • Capan 2
  • CAPAN 2
  • Capan2
  • CAPAN2

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Polügonaalne
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel. Moodustab hästi diferentseeritud adenokartsinoomi, mis on kooskõlas kõhunäärme kartsinoomiga
Ploidsus
Aneuploidne
Kahekordistumisaeg
45-60 tundi

04Tunnused

Viide
Capan-2 (Cytioni katalooginumber 300144)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0026

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53 negatiivne
Antigeeni ekspressioon
Veregrupp B, Rh+
Isoensüümid
Me-2, 2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, fenotüübi sagedustoode: 0.0004
Mutatsiooniprofiil
Capan-2 rakkudes on heterosügootne Kras-mutatsioon koodonis12: GGT>GTT
Tooted
Mütsiin (apomütsiin, MUC-1, MUC-2)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
McCoys 5a, w: 3,0 g/L glükoos, w: stabiilne glutamiin, w: 2,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820200a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 annab 7 päeva jooksul konfluentse monokihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 48 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
56 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia