Mine otse sisu juurde
GH3
Kude
Aju, Hüpofüüsi
Haigus
Kasvaja
Sünonüümid
GH 3

Dokumendid

GH3

Cell line · Toote number 300383

The GH3 cell line, originating from a rat pituitary tumor, is a critical resource in the study of pituitary functions, particularly regarding the secretio...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

GH3 rakuliin, mis pärineb roti hüpofüüsi kasvajast, on kriitiline ressurss hüpofüüsi funktsioonide uurimisel, eriti seoses prolaktiini ja kasvuhormooni sekretsiooniga. Need rakud omavad nii somatotroopsete kui ka laktotroopsete rakkude omadusi, mis võimaldab üksikasjalikult uurida hüpofüüsi hormoone ja nende regulatiivseid mehhanisme. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt, et mõista hormonaalse ravi ja geneetiliste modifikatsioonide mõju nende hormoonide sekretsioonile. GH3 rakud reageerivad märkimisväärselt kilpnääret stimuleerivatele hormoonidele, mis teeb neist väärtusliku mudeli katsete jaoks, millega mõõdetakse erinevate ühendite mõju hüpofüüsi tegevusele.

GH3 rakke kasutavates uuringutes uuritakse sageli, kuidas need rakud reageerivad erinevatele hormonaalsetele stiimulitele. Näiteks on teada, et hüdrokortisoon soodustab kasvuhormooni tootmist, samas kui see pärsib neis rakkudes prolaktiini tootmist, mistõttu on GH3 eelistatud mudeliks hormonaalse tasakaalu ja endokriinsüsteemi reaktsiooni uurimiseks stressile ja muudele füsioloogilistele teguritele. Sellised uuringud on otsustava tähtsusega hüpofüüsi häirete mõistmisel ja selliste seisundite nagu kasvupuudulikkus ja hüperprolaktineemia ravimeetodite väljatöötamisel.

Lisaks sellele on GH3 rakud olulised farmakoloogilistes testides ja biotehnoloogilistes rakendustes, mille eesmärk on välja töötada ravi hüpofüüsiga seotud häirete raviks. Nende võime toota rohkem kasvuhormooni kui GH1-rakud koos prolaktiiniga võimaldab teadlastel uurida nende hormoonide regulatsiooni ja mõju erinevates tingimustes. See ainulaadne profiil on oluline endokriinsüsteemi keeruliste vastastikmõjude mõistmiseks ja sihipärase terapeutilise sekkumise väljatöötamiseks.

Kude
Aju, Hüpofüüsi
Haigus
Kasvaja
Sünonüümid
  • GH 3

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Adhesiivne ja suspensioon
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
GH3 (Cytioni katalooginumber 300383)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_0273

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Tooted
Kasvuhormoon, prolaktiin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamiin, w: 2,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820608a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 15% hobuse seerumiga, 2,5% soojusinaktiveeritud FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Koguge suspensioonirakud 15 ml tuubi ja peske kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel 10 minutit toatemperatuuril inkubeerida. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
Wistar Furth
Doonori vanus
7 kuud