Siirry sisältöön
Capan-2-solut
Kudos
Haima
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
CaPan-2, CAPAN-2, Capan 2, CAPAN 2, Capan2, CAPAN2

Asiakirjat

Capan-2-solut

Cell line · Tuotenumero 300144

Capan-2-solulinja on ihmisen haiman adenokarsinooman solulinja, joka eristettiin alun perin 56-vuotiaan valkoihoisen miehen haimakasvaimen kudoksesta. Se...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa vähän
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Capan-2-solulinja on ihmisen haiman adenokarsinooman solulinja, joka eristettiin ensimmäisen kerran 56-vuotiaan valkoihoisen miehen haimakasvainkudoksesta. Se on peräisin maksassa olevasta etäpesäkkeestä, mikä osoittaa sen olevan peräisin sekundaarikasvaimesta, mikä tekee siitä erityisen arvokkaan metastaattisten prosessien ja haimasyövän biologian tutkimuksessa. Soluilla on epiteelimorfologia, ja niitä on hyödynnetty laajasti haimasyövän, lääkeresistenssin ja kasvainten biologian tutkimiseen.

Capan-2-solujen tiedetään ilmentävän haimasyövässä yleisenä mutaationa esiintyvän Kirsten rotan sarkoomavirusonkogeenin homologin (KRAS) mutatoitunutta muotoa, mikä tekee niistä vankan mallin KRAS-ohjatun kasvainten synnyn tutkimiseen. Lisäksi niille on ominaista kasvainsuppressorigeeni p53:n mutaatioiden ilmentyminen, ja niillä on havaittu olevan kromosomaalista epävakautta, jotka ovat syövän etenemisen ja hoitovasteen kannalta kriittisiä piirteitä. Tätä solulinjaa on käytetty lukuisissa tutkimuksissa, muun muassa kemoterapian tehon arvioinnissa, syövän etenemisen molekyylireittien tutkimisessa ja kohdennettujen hoitostrategioiden kehittämisessä.

Kudos
Haima
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
  • CaPan-2
  • CAPAN-2
  • Capan 2
  • CAPAN 2
  • Capan2
  • CAPAN2

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Polygonal
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä. Muodostaa hyvin erilaistunutta adenokarsinoomaa, joka on yhdenmukainen haimasyövän kanssa
Ploidisuus
Aneuploidinen
Kaksinkertaistumisaika
45-60 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
Capan-2 (Cytionin luettelonumero 300144)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0026

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
P53 negatiivinen
Antigeenin ilmentyminen
Veriryhmä B, Rh+
Isoentsyymit
Me-2, 2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Fenotyypin frekvenssituote: 0.0004
Mutaatioprofiili
Capan-2-soluissa on heterotsygoottinen Kras-mutaatio koodonissa 12: GGT>GTT
Tuotteet
Musiini (apomusiini, MUC-1, MUC-2)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukoosia, w: vakaa glutamiini, w: 2,0 mM natriumpyruvaattia, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820200a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2 tuottaa yhtenäisen yksikerroksen 7 päivän kuluessa.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua jäädyttämisprosessista ja kiinnittyä vähintään 48 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
56 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen