Siirry sisältöön
H-4-II-E
Kudos
Maksa
Sairaus
Rotan hepatosellulaarinen karsinooma
Synonyymit
H-4-II-E, H4IIE

Asiakirjat

H-4-II-E

Cell line · Tuotenumero 305204

The H-4-II-E cell line is a hepatoma-derived cell line, specifically developed from the liver tissue of an adult rat. This cell line is frequently utilize...

€500.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

H-4-II-E-solulinja on maksasyövästä peräisin oleva solulinja, joka on kehitetty nimenomaan aikuisen rotan maksakudoksesta. Tätä solulinjaa käytetään usein maksan fysiologiaan ja patologiaan keskittyvässä tutkimuksessa, erityisesti hepatosellulaariseen karsinoomaan ja maksan aineenvaihduntaan liittyvissä tutkimuksissa. H-4-II-E-solut ovat morfologialtaan epiteelin kaltaisia ja tunnetaan nopeasta kasvuvauhdistaan ja korkeasta solutiheydestään, mikä tekee niistä arvokkaan mallin suurikapasiteettiseen seulontaan ja toksikologisiin tutkimuksiin.

Erityisesti H-4-II-E-solut osoittavat useita erilaistuneita hepatosyyttien toimintoja, mukaan lukien albumiinin eritys, ammoniakin tuotanto ja sytokromi P450 -entsyymien esiintyminen. Tämä tekee niistä erinomaisen työkalun lääkeaineenvaihdunnan, entsyymi-induktion ja ihmisen maksasairauksissa mahdollisesti esiintyvien vuorovaikutusten tutkimiseen. Lisäksi näitä soluja on käytetty maksan uudistumisen ja syövän etenemisen mekanismien tutkimiseen, mikä on antanut tietoa solujen reaktioista erilaisiin ärsykkeisiin, kuten sytokiinien ja kasvutekijöiden vaikutuksiin.

Kudos
Maksa
Sairaus
Rotan hepatosellulaarinen karsinooma
Synonyymit
  • H-4-II-E
  • H4IIE

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
H-4-II-E (Cytionin luettelonumero 305204)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_0284

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
2–4 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Rotua / alalajia
AxC