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H-4-II-E
Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare di ratto
Sinonimi
H-4-II-E, H4IIE

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H-4-II-E

Cell line · Codice prodotto 305204

The H-4-II-E cell line is a hepatoma-derived cell line, specifically developed from the liver tissue of an adult rat. This cell line is frequently utilize...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare H-4-II-E è una linea cellulare derivata da epatoma, sviluppata specificamente dal tessuto epatico di un ratto adulto. Questa linea cellulare è spesso utilizzata nella ricerca sulla fisiologia e la patologia del fegato, in particolare negli studi sul carcinoma epatocellulare e sul metabolismo epatico. Le cellule H-4-II-E hanno una morfologia simile a quella epiteliale e sono note per il loro rapido tasso di crescita e l'elevata densità cellulare, che le rendono un modello prezioso per gli studi di screening e tossicologia ad alto rendimento.

In particolare, le cellule H-4-II-E presentano diverse funzioni differenziate degli epatociti, tra cui la secrezione di albumina, la produzione di ammoniaca e la presenza di enzimi del citocromo P450. Ciò le rende uno strumento eccellente per studiare il metabolismo dei farmaci, l'induzione enzimatica e le interazioni che possono verificarsi nelle malattie epatiche umane. Inoltre, queste cellule sono state utilizzate per studiare i meccanismi di rigenerazione del fegato e di progressione del cancro, fornendo approfondimenti sulle risposte cellulari a vari stimoli come citochine e fattori di crescita.

Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare di ratto
Sinonimi
  • H-4-II-E
  • H4IIE

02Classificazione

Organismo
Ratto
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
H-4-II-E (numero di catalogo Cytion 305204)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0284

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
Da 2 a 4 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Razza / sottospecie
AxC