B-LCL-CDG3

B-LCL-CDG3 est une lignée de lymphocytes B transformée par l'EBV et dérivée d'un patient atteint de PMM2-CDG, un trouble congénital de la glycosylation (CDG) causé par des mutations dans le gène *PMM2*. PMM2 code pour la phosphomannomutase 2, une enzyme clé de la voie de N-glycosylation, responsable de la conversion du mannose-6-phosphate en mannose-1-phosphate. Les déficiences en PMM2 entraînent une altération de la glycosylation de multiples glycoprotéines et glycolipides, ce qui conduit à un large éventail de manifestations cliniques, notamment des dysfonctionnements neurologiques, hépatiques et endocriniens.

En tant que lignée de cellules B immortalisées par l'EBV, B-LCL-CDG3 constitue un modèle in vitro précieux pour l'étude des effets moléculaires des mutations *PMM2*. Cette lignée cellulaire peut être utilisée pour analyser les défauts de glycosylation, étudier l'activité enzymatique de PMM2 et tester des stratégies thérapeutiques potentielles, telles que les thérapies d'amélioration enzymatique ou la supplémentation en substrat. B-LCL-CDG3, ainsi que d'autres modèles cellulaires dérivés de patients atteints de CDG, contribuent à faire progresser la recherche sur la physiopathologie de la CDG et le développement de traitements.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie