
- Ιστός
- Περιφερικό αίμα
- Ασθένεια
- Συγγενείς διαταραχές της γλυκοζυλίωσης
- Θέση μετάστασης
- Δεν ισχύει (B-LCL που έχει μετασχηματιστεί από τον ιό EBV· μη μεταστατική)
Έγγραφα
B-LCL-CDG3
Cell line · Αριθμός προϊόντος 302014
B-LCL-CDG3 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a patient with PMM2-CDG, a congenital disorder of glycosylation (CDG) caused by mutat...
Προσαρμογή / Προτάσεις
- B-LCL-CDG3Cell line€800.00
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
01Γενικές πληροφορίες
- Περιγραφή
Το B-LCL-CDG3 είναι μια μετασχηματισμένη από EBV κυτταρική σειρά Β λεμφοκυττάρων που προέρχεται από ασθενή με PMM2-CDG, μια συγγενή διαταραχή της γλυκοζυλίωσης (CDG) που προκαλείται από μεταλλάξεις στο γονίδιο *PMM2*. Το PMM2 κωδικοποιεί τη φωσφομαννομουτάση 2, ένα βασικό ένζυμο στην οδό Ν-γλυκοζυλίωσης, υπεύθυνο για τη μετατροπή της φωσφορικής μαννόζης-6 σε φωσφορική μαννόζη-1. Οι ανεπάρκειες της PMM2 έχουν ως αποτέλεσμα τη μειωμένη γλυκοζυλίωση πολλαπλών γλυκοπρωτεϊνών και γλυκολιπιδίων, οδηγώντας σε ένα ευρύ φάσμα κλινικών εκδηλώσεων, συμπεριλαμβανομένων νευρολογικών, ηπατικών και ενδοκρινικών δυσλειτουργιών.
Ως αθανατισμένη από τον EBV σειρά Β κυττάρων, η B-LCL-CDG3 χρησιμεύει ως πολύτιμο in vitro μοντέλο για τη μελέτη των μοριακών επιδράσεων των μεταλλάξεων *PMM2*. Αυτή η κυτταρική σειρά μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ανάλυση των ελαττωμάτων γλυκοζυλίωσης, τη διερεύνηση της δραστηριότητας του ενζύμου PMM2 και τη δοκιμή πιθανών θεραπευτικών στρατηγικών, όπως οι θεραπείες ενίσχυσης του ενζύμου ή η συμπλήρωση υποστρώματος. Το B-LCL-CDG3, μαζί με άλλα κυτταρικά μοντέλα που προέρχονται από ασθενείς με CDG, συμβάλλει στην προώθηση της έρευνας σχετικά με την παθοφυσιολογία της CDG και την ανάπτυξη θεραπείας.
- Ιστός
- Περιφερικό αίμα
- Ασθένεια
- Συγγενείς διαταραχές της γλυκοζυλίωσης
- Θέση μετάστασης
- Δεν ισχύει (B-LCL που έχει μετασχηματιστεί από τον ιό EBV· μη μεταστατική)
- Εφαρμογές
- Γονότυπος των επιδράσεων του CDG στα ανοσοκύτταρα, λειτουργικός έλεγχος (π.χ. αντιγόνα επιφάνειας των Β κυττάρων), έλεγχος κυτταροτοξικών φαρμάκων. Ανάλυση μεταλλάξεων, ανάλυση αποπτωτικών μηχανισμών, HLA-typing, επιπτώσεις της ελαττωματικής γλυκοζυλίωσης διαφορετικών κυτταρικών γλυκοπρωτεϊνών σε διάφορες λειτουργίες.
02Ταξινόμηση
- Οργανισμός
- Άνθρωπος
- Σεξ
- Γυναίκα
- Ιδιότητες ανάπτυξης
- Αναστολή
- Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
- GMO-S2
- Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
- GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- 2
03Χαρακτηριστικά
- Μορφολογία
- Στρογγυλά κύτταρα
- Τύπος κυττάρου
- Λεμφοκύτταρο Β
04Αναγνωριστικά
- Παραπομπή
- B-LCL-CDG3 (αριθμός καταλόγου Cytion 302014)
- Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
- 9606
- Κελλοσαύρος
- Not assigned
05Έκφραση και ευαισθησία
- Ιοί
- Μετασχηματιστής: EBV
06Χειρισμός και καλλιέργεια
- Θρεπτικό μέσο
- RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
- Ατμόσφαιρα επώασης
37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.
- Συμπληρώματα
- Συμπληρώστε το θρεπτικό μέσο με 10% θερμικά αδρανοποιημένο FBS
- Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
- Διατηρήστε τις καλλιέργειες προσθέτοντας ή αντικαθιστώντας περιοδικά το μέσο. Ξεκινήστε τις καλλιέργειες με πυκνότητα 2 x 105 κύτταρα/ml και διατηρήστε τη συγκέντρωση των κυττάρων εντός του εύρους 1 x 105 έως 5 x 105 κύτταρα/ml για βέλτιστη ανάπτυξη.
- Ανανέωση υγρών
- Μόλις το μεσαίο χρώμα μετατραπεί σε κίτρινο
- Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
- Μεσαίο
- Απόψυξη και καλλιέργεια
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση
- Στειρότητα
Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.
Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.
- Μέσο κατάψυξης
- Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
- Συνθήκες αποθήκευσης
Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.
- Όροι αποστολής
Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.
08Δωρητής
- Εθνικότητα
- Καυκάσιος
09Νομικά θέματα και ασφάλεια
- Μέτρα ασφαλείας
- Όταν σχεδιάζετε να αποθηκεύσετε ένα κρυοφιαλίδιο σε υγρό άζωτο για μελλοντική απόψυξη, είναι υποχρεωτικό να τηρείτε αυστηρά μέτρα ασφαλείας. Τα κατάλληλα προστατευτικά γάντια και ο κατάλληλος προστατευτικός ρουχισμός είναι απαραίτητα, ενώ απαιτείται η χρήση μάσκας προσώπου ή γυαλιών ασφαλείας κατά τη μεταφορά κατεψυγμένων δειγμάτων προς ή από τη δεξαμενή υγρού αζώτου. Αυτό γίνεται για να μετριαστεί ο κίνδυνος τραυματισμού από πιθανές εκρήξεις κρυοσωλήνων κατά την απομάκρυνση, οι οποίες μπορεί να οδηγήσουν στην προβολή αιχμηρών θραυσμάτων.
- Εγγύηση
Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος
Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης
- Απαιτείται συμφωνία μεταφοράς υλικού
- Ναι