Preskoči na vsebino
B-LCL-CDG3
Tkivo
Periferna kri
Bolezen
Prirojene motnje glikozilacije
Mesto metastaze
Ne velja (EBV-transformirane B-LCL; brez metastaz)

Dokumenti

B-LCL-CDG3

Cell line · Številka izdelka 302014

B-LCL-CDG3 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a patient with PMM2-CDG, a congenital disorder of glycosylation (CDG) caused by mutat...

€800.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

B-LCL-CDG3 je z EBV transformirana celična linija limfocitov B, pridobljena od bolnika s PMM2-CDG, prirojeno motnjo glikozilacije (CDG) zaradi mutacij v genu *PMM2*. PMM2 kodira fosfomanomutazo 2, ključni encim v poti N-glikozilacije, odgovoren za pretvorbo manoza-6-fosfata v manoza-1-fosfat. Pomanjkanje PMM2 povzroči moteno glikozilacijo številnih glikoproteinov in glikolipidov, kar vodi do širokega spektra kliničnih manifestacij, vključno z nevrološkimi, jetrnimi in endokrinimi motnjami.

B-LCL-CDG3 je linija celic B, imortalizirana z virusom EBV, in je dragocen in vitro model za preučevanje molekularnih učinkov mutacij *PMM2*. To celično linijo je mogoče uporabiti za analizo okvar glikozilacije, raziskovanje aktivnosti encima PMM2 in preskušanje morebitnih terapevtskih strategij, kot so terapije za izboljšanje encima ali dodajanje substrata. B-LCL-CDG3 skupaj z drugimi celičnimi modeli, ki izhajajo iz bolnikov s CDG, prispeva k napredku raziskav patofiziologije CDG in razvoju zdravljenja.

Tkivo
Periferna kri
Bolezen
Prirojene motnje glikozilacije
Mesto metastaze
Ne velja (EBV-transformirane B-LCL; brez metastaz)
Uporaba
Genotipizacija učinkov CDG v imunskih celicah, funkcionalno testiranje (npr. površinski antigeni celic B), testiranje citotoksičnih zdravil. Mutacijska analiza, analiza apoptotičnih mehanizmov, tipizacija HLA, vpliv okvarjene glikozilacije različnih celičnih glikoproteinov na različne funkcije.

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Status GSO
GMO-S2
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Okrogle celice
Vrsta celice
Limfocit B

04Identifikatorji

Navajanje vira
B-LCL-CDG3 (kataloška številka Cytion 302014)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Izražanje in dovzetnost

Virusi
Transformant: EBV

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % toplotno aktiviranega FBS
Preusmeritev v drugo kulturo
Kulture vzdržujte z rednim dodajanjem ali zamenjavo gojišča. Kulture začnite z gostoto 2 x 105 celic/ml in za optimalno rast ohranjajte koncentracijo celic v območju od 1 x 105 do 5 x 105 celic/ml.
Obnova tekočine
Ko se srednja barva spremeni v rumeno
Obnova po odtaljevanju
Srednja
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Etnična pripadnost
Kavkaški