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FRTL-5
Tissu
Thyroïdée
Synonymes
FRTL 5, FRTL5, FRTL-5 Cl 2

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FRTL-5

Cell line · Référence du produit 500407

The FRTL-5 cell line, derived from normal rat thyroid follicular cells, plays a significant role in thyroid research, particularly focusing on the physiol...

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1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire FRTL-5, dérivée de cellules folliculaires thyroïdiennes normales de rat, joue un rôle important dans la recherche sur la thyroïde, en particulier en ce qui concerne la physiologie et la pathophysiologie de la glande. Ces cellules se caractérisent par leur dépendance à l'hormone thyréostimulante (TSH) pour la prolifération, ce qui en fait un modèle essentiel pour l'étude de la régulation de la TSH et de la biosynthèse des hormones thyroïdiennes. Il est important de noter que les cellules FRTL-5 conservent la capacité d'absorber l'iodure, ce qui est crucial pour étudier le métabolisme de l'iodure et la production d'hormones thyroïdiennes. Cette caractéristique souligne leur utilité dans l'étude de la fonction thyroïdienne et de ses dysfonctionnements.

Outre leur rôle fondamental dans les études sur les hormones thyroïdiennes, les cellules FRTL-5 ont permis d'étudier l'influence des facteurs de croissance, des cytokines et des oncogènes sur la biologie de la thyroïde. Leur expression constante de marqueurs spécifiques de la thyroïde, notamment la thyroglobuline et la thyroperoxydase, les rend précieuses pour les études de biologie moléculaire et cellulaire visant à comprendre les maladies liées à la thyroïde. Ainsi, les cellules FRTL-5 sont fréquemment utilisées dans la recherche sur le cancer de la thyroïde, les maladies thyroïdiennes auto-immunes et d'autres troubles connexes, ce qui permet de mieux comprendre les mécanismes cellulaires à l'origine de ces affections.

En outre, la lignée cellulaire FRTL-5 a joué un rôle essentiel dans la recherche sur les troubles thyroïdiens auto-immuns tels que la maladie de Graves. Elle a été utilisée pour tester l'activité des immunoglobulines dans des échantillons humains, offrant un modèle robuste et reproductible pour étudier les interactions auto-immunes avec les cellules thyroïdiennes. Le modèle de croissance tridimensionnel de ces cellules offre un environnement plus physiologiquement pertinent pour examiner le comportement des cellules et les interactions intercellulaires dans la biologie thyroïdienne. Ces caractéristiques, combinées à des décennies de recherche sur les cellules FRTL-5, soulignent leur importance pour faire progresser notre compréhension de la santé et de la maladie thyroïdiennes.

Tissu
Thyroïdée
Synonymes
  • FRTL 5
  • FRTL5
  • FRTL-5 Cl 2

02Classification

Organisme
Rat
Sexe
Non précisé
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Temps de doublement
30-34 heures

04Identifiants

Référence
FRTL-5 (numéro de catalogue Cytion 500407)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0265

05Manipulation et culture

Milieu de culture
Ham's F12, w : 1.0 mM Glutamine stable, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium, w : 1.1 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820600a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 5 % de FBS, 10 mg/l d'insuline, 5 mg/l de transferrine, 50 microgrammes/l d'hydrocortisone, 10 microgrammes/l de somatostatine, 10 microgrammes/l de Gly-His-Lsy-acétate, 0,0165 microgramme/ml de TSH bovine (numéro de catalogue T1614 des laboratoires Scripps) - Ajouter la TSH nécessaire juste avant l'utilisation et la filtrer stérilement dans le milieu.
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Race / sous-espèce
Fischer
Âge du donneur
6 semaines