Mine otse sisu juurde
FRTL-5
Kude
Thyroidea
Sünonüümid
FRTL 5, FRTL5, FRTL-5 Cl 2

Dokumendid

FRTL-5

Cell line · Toote number 500407

The FRTL-5 cell line, derived from normal rat thyroid follicular cells, plays a significant role in thyroid research, particularly focusing on the physiol...

€650.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

FRTL-5 rakuliin, mis on saadud roti normaalsetest kilpnäärme folliikularakkudest, mängib olulist rolli kilpnäärme uurimisel, keskendudes eelkõige selle näärme füsioloogiale ja patofüsioloogiale. Neid rakke iseloomustab nende sõltuvus kilpnääret stimuleerivast hormoonist (TSH) proliferatsiooniks, mis muudab nad oluliseks mudeliks TSH regulatsiooni ja kilpnäärmehormooni biosünteesi uurimiseks. Oluline on, et FRTL-5 rakud säilitavad võime võtta jodiidi, mis on oluline jodi metabolismi ja kilpnäärmehormoonide tootmise uurimiseks. See omadus rõhutab nende kasulikkust kilpnäärme funktsiooni ja talitlushäirete uurimisel.

Lisaks nende põhilisele rollile kilpnäärmehormooni uuringutes on FRTL-5 rakud olnud olulised kasvufaktorite, tsütokiinide ja onkogeenide mõju uurimisel kilpnäärme bioloogiale. Kilpnäärme-spetsiifiliste markerite, sealhulgas türeoglobuliini ja türoperoksidaasi järjepidev ekspressioon muudab nad väärtuslikuks molekulaar- ja rakubioloogilistes uuringutes, mille eesmärk on mõista kilpnäärmega seotud haigusi. Seetõttu kasutatakse FRTL-5 rakke sageli kilpnäärmevähi, autoimmuunse kilpnäärmehaiguse ja muude sellega seotud haiguste uurimisel, andes olulise panuse nende seisundite rakumehhanismide uurimisse.

Lisaks on FRTL-5 rakuliin olnud oluline autoimmuunsete kilpnäärme haiguste, näiteks Graves'i tõve uurimisel. Seda on kasutatud immunoglobuliinide aktiivsuse määramiseks inimproovides, pakkudes usaldusväärset ja korratavat mudelit autoimmuunse interaktsiooni uurimiseks kilpnäärmerakkudega. Nende rakkude kolmemõõtmeline kasvumuster pakub füsioloogiliselt asjakohasemat keskkonda rakkude käitumise ja rakkudevaheliste interaktsioonide uurimiseks kilpnäärme bioloogias. Need omadused koos FRTL-5 rakkude aastakümneid kestnud uuringutega rõhutavad nende tähtsust kilpnäärme tervise ja haiguste mõistmise edendamisel.

Kude
Thyroidea
Sünonüümid
  • FRTL 5
  • FRTL5
  • FRTL-5 Cl 2

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Kahekordistumisaeg
30-34 tundi

04Tunnused

Viide
FRTL-5 (Cytioni katalooginumber 500407)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_0265

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilne glutamiin, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820600a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendage keskkonda 5% FBS, 10 mg/L insuliini, 5 mg/L transferriini, 50 mikrogrammi/L hüdrokortisooni, 10 mikrogrammi/L somatostatiini, 10 mikrogrammi/L Gly-His-Lsy-atsetaadi, 0,0165 mikrogrammi/ml veiste TSH (katalooginumber T1614 Scripps Laboratories) - Lisage vajalik TSH vahetult enne kasutamist ja filtreerige steriilselt keskkonda.
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
Fischer
Doonori vanus
6 nädalat