Pāriet uz saturu
FRTL-5
Audums
Thyroidea
Sinonīmi
FRTL 5, FRTL5, FRTL-5 Cl 2

Dokumenti

FRTL-5

Cell line · Preces numurs 500407

The FRTL-5 cell line, derived from normal rat thyroid follicular cells, plays a significant role in thyroid research, particularly focusing on the physiol...

€650.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

FRTL-5 šūnu līnijai, kas iegūta no normālām žurku vairogdziedzera folikulāršūnu šūnām, ir nozīmīga loma vairogdziedzera pētījumos, īpaši pievēršoties dziedzera fizioloģijai un patofizioloģijai. Šīm šūnām ir raksturīga atkarība no vairogdziedzera stimulējošā hormona (TSH) proliferācijas, padarot tās par būtisku modeli TSH regulācijas un vairogdziedzera hormonu biosintēzes pētījumiem. Svarīgi, ka FRTL-5 šūnas saglabā spēju uzņemt jodīdu, kas ir ļoti svarīgi, lai pētītu jodīdu metabolismu un vairogdziedzera hormonu ražošanu. Šī īpašība uzsver to lietderību vairogdziedzera funkciju un disfunkciju izpētē.

FRTL-5 šūnas ir ne tikai būtiski svarīgas vairogdziedzera hormonu pētījumos, bet arī palīdzēja izpētīt augšanas faktoru, citokīnu un onkogēnu ietekmi uz vairogdziedzera bioloģiju. To pastāvīgā vairogdziedzera specifisko marķieru, tostarp tiroglobulīna un tiroperoksidāzes, ekspresija padara tās vērtīgas molekulārās un šūnu bioloģijas pētījumos, kuru mērķis ir izprast ar vairogdziedzeri saistītas slimības. Tāpēc FRTL-5 šūnas bieži izmanto pētījumos, kas saistīti ar vairogdziedzera vēzi, autoimūnām vairogdziedzera slimībām un citām saistītām slimībām, sniedzot būtisku ieskatu šūnas mehānismos, kas izraisa šīs slimības.

Turklāt FRTL-5 šūnu līnija ir bijusi ļoti svarīga pētījumos, kas saistīti ar autoimūniem vairogdziedzera traucējumiem, piemēram, Greivsa slimību. Tā ir izmantota imūnglobulīnu aktivitātes noteikšanai cilvēka paraugos, piedāvājot stabilu un reproducējamu modeli autoimūnu mijiedarbības ar vairogdziedzera šūnām izpētei. Šo šūnu trīsdimensiju augšanas modelis nodrošina fizioloģiski atbilstošāku vidi šūnu uzvedības un starpšūnu mijiedarbības izpētei vairogdziedzera bioloģijā. Šīs īpašības apvienojumā ar gadu desmitiem ilgiem pētījumiem, kuros izmantotas FRTL-5 šūnas, uzsver to nozīmi, lai uzlabotu mūsu izpratni par vairogdziedzera veselību un slimībām.

Audums
Thyroidea
Sinonīmi
  • FRTL 5
  • FRTL5
  • FRTL-5 Cl 2

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
30-34 stundas

04Identifikatori

Atsauce
FRTL-5 (Cytion kataloga numurs 500407)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_0265

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
Hama F12, w: 1,0 mM stabils glutamīns, w: 1,0 mM nātrija piruvāts, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820600a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 5 % FBS, 10 mg/l insulīna, 5 mg/l transferīna, 50 mikrogramu/l hidrokortisona, 10 mikrogramu/l somatostatīna, 10 mikrogramu/l gli-His-Lsy-acetāta, 0,0165 mikrogramu/ml liellopu TSH (kataloga numurs T1614 no Scripps Laboratories) - Pievienojiet nepieciešamo TSH tieši pirms lietošanas un sterili filtrējiet barotnē.
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Fischer
Donora vecums
6 nedēļas