Přejít na obsah
FRTL-5
Tkáň
Thyroidea
Synonyma
FRTL 5, FRTL5, FRTL-5 Cl 2

Dokumenty

FRTL-5

Cell line · Číslo výrobku 500407

The FRTL-5 cell line, derived from normal rat thyroid follicular cells, plays a significant role in thyroid research, particularly focusing on the physiol...

€650.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie FRTL-5, odvozená z normálních folikulárních buněk štítné žlázy potkana, hraje významnou roli ve výzkumu štítné žlázy, zejména se zaměřením na fyziologii a patofyziologii této žlázy. Tyto buňky se vyznačují závislostí na hormonu stimulujícím štítnou žlázu (TSH), což z nich činí základní model pro studium regulace TSH a biosyntézy hormonů štítné žlázy. Důležité je, že buňky FRTL-5 si zachovávají schopnost vychytávat jodidy, což je zásadní pro zkoumání metabolismu jodidů a produkce hormonů štítné žlázy. Tato vlastnost podtrhuje jejich užitečnost při zkoumání funkce a dysfunkcí štítné žlázy.

Kromě zásadní role při studiu hormonů štítné žlázy se buňky FRTL-5 podílejí na zkoumání vlivu růstových faktorů, cytokinů a onkogenů na biologii štítné žlázy. Jejich konzistentní exprese markerů specifických pro štítnou žlázu, včetně tyreoglobulinu a tyreoperoxidázy, je činí cennými pro molekulární a buněčné biologické studie zaměřené na pochopení nemocí souvisejících se štítnou žlázou. Buňky FRTL-5 jsou proto často využívány ve výzkumu zabývajícím se rakovinou štítné žlázy, autoimunitním onemocněním štítné žlázy a dalšími souvisejícími poruchami, což přispívá k významnému poznání buněčných mechanismů, které jsou příčinou těchto stavů.

Buněčná linie FRTL-5 má navíc zásadní význam pro výzkum autoimunitních poruch štítné žlázy, jako je Gravesova choroba. Byla použita k testování aktivity imunoglobulinů v lidských vzorcích a nabízí robustní a reprodukovatelný model pro studium autoimunitních interakcí s buňkami štítné žlázy. Trojrozměrný model růstu těchto buněk poskytuje fyziologicky relevantnější prostředí pro zkoumání chování buněk a mezibuněčných interakcí v biologii štítné žlázy. Tyto vlastnosti v kombinaci s desítkami let výzkumu využívajícího buňky FRTL-5 podtrhují jejich význam pro lepší pochopení zdraví a onemocnění štítné žlázy.

Tkáň
Thyroidea
Synonyma
  • FRTL 5
  • FRTL5
  • FRTL-5 Cl 2

02Klasifikace

Organismus
Krysa
Sex
Nespecifikováno
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Doba zdvojnásobení
30-34 hodin

04Identifikátory

Citace
FRTL-5 (katalogové číslo Cytion 500407)
Daňové identifikační číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0265

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilní glutamin, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 1,1 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820600a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 5 % FBS, 10 mg/l inzulínu, 5 mg/l transferinu, 50 mikrogramů/l hydrokortizonu, 10 mikrogramů/l somatostatinu, 10 mikrogramů/l gly-His-Lsy-acetátu, 0,0165 mikrogramů/ml hovězího TSH (katalogové číslo T1614 od Scripps Laboratories) - Přidejte požadovaný TSH těsně před použitím a sterilně jej přefiltrujte do média.
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Plemeno / poddruh
Fischer
Věk dárce
6 týdnů