B-LCL-HROC75

B-LCL-HROC75 è una linea cellulare linfoblastoide B umana immortalizzata dal virus di Epstein-Barr (EBV) ottenuta da linfociti B isolati dal tessuto tumorale o dal sangue periferico di un paziente adulto. Le cellule sono state generate mediante infezione ex vivo con supernatante contenente EBV derivato dalla linea cellulare B95/8 di marmoset in presenza di ciclosporina A per sopprimere la crescita delle cellule T e NK. Dopo diverse settimane di coltura, è stata ottenuta una crescita linfoblastoide stabile, che ha portato a una popolazione di cellule B monoclonali o oligoclonali in continua proliferazione, adatta all'espansione in vitro a lungo termine.

Dal punto di vista immunofenotipico, B-LCL-HROC75 presenta un profilo di cellule B mature e attivate caratterizzato dall'espressione di CD19 e CD20, insieme ad alti livelli di marcatori di attivazione e maturazione come CD23 e CD80. La forte espressione delle molecole MHC di classe I e II indica una capacità di presentazione dell'antigene preservata. A seconda del singolo clone, si può osservare un'espressione variabile di marcatori associati alla differenziazione come CD27, CD38 o CD138, che riflettono diversi stadi di maturazione delle cellule B. Le cellule sono negative ai marcatori delle cellule T, a conferma della specificità della linea cellulare.

Dal punto di vista funzionale, B-LCL-HROC75 secerne immunoglobuline di un isotipo definito (ad esempio IgG, IgM o IgA), che rimangono stabili durante la coltura prolungata. Gli anticorpi secreti possono essere raccolti dai supernatanti di coltura e utilizzati per applicazioni a valle, tra cui test di legame dell'antigene, studi di riconoscimento delle cellule tumorali o identificazione di antigeni associati alla malattia. Come modello di cellule B immortalizzate dall'EBV, B-LCL-HROC75 fornisce una solida piattaforma in vitro per lo studio delle risposte immunitarie umorali, dell'attivazione e della differenziazione delle cellule B e dei meccanismi mediati dagli anticorpi nel contesto dell'immunologia tumorale o delle risposte immunitarie sistemiche.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia