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COLO-680N
Tessuto
Esofago
Malattia
Carcinoma a cellule squamose
Sinonimi
COLO 680N, COLO #680N, COLO680N, Colorado 680N

Documenti

COLO-680N

Cell line · Codice prodotto 300464

COLO-680N is a human esophageal squamous cell carcinoma cell line derived from the tumor biopsy of a 58-year-old woman in 1985. This derivation was unique...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
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1

01Informazioni generali

Descrizione

COLO-680N è una linea cellulare di carcinoma squamoso esofageo umano derivata dalla biopsia tumorale di una donna di 58 anni nel 1985. Questa derivazione è unica nel suo genere in quanto prevede il passaggio in un topo nudo, un metodo utilizzato per migliorare la crescita e l'adattamento delle cellule tumorali in vitro sfruttando la natura immunodeficiente del topo. Questo processo seleziona potenzialmente le cellule tumorali più aggressive e clinicamente rilevanti, rendendo il COLO-680N particolarmente prezioso per lo studio dell'intricata biologia del carcinoma a cellule squamose dell'esofago, uno dei principali sottotipi di cancro esofageo.

Tessuto
Esofago
Malattia
Carcinoma a cellule squamose
Applicazioni
L'espressione di BMP-6 può essere utilizzata come co-indicatore di prognosi nel carcinoma esofageo a cellule squamose. Piattaforma in-vitro per la coltivazione a lungo termine di Cryptosporidium parvum
Sinonimi
  • COLO 680N
  • COLO #680N
  • COLO680N
  • Colorado 680N

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tempo di raddoppio
60 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
COLO-680N (numero di catalogo Cytion 300464)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1131

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
BMP-6

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
2 x 104 cellule/cm2 produrranno uno strato confluente in circa 4-5 giorni.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
57 anni
Etnia
Africano