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HK-CRISPR-Tpr-mEGFP
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HK-CRISPR-Tpr-mEGFP

Cell line · 제품 번호 300662

The HK-CRISPR-Tpr-mEGFP cell line is a specialized model developed for advanced genetic research, particularly in genome editing and gene expression studi...

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1

01일반 정보

설명

HK-CRISPR-Tpr-mEGFP 세포주는 특히 게놈 편집 및 유전자 발현 연구와 같은 고급 유전 연구를 위해 개발된 특수 모델입니다. HeLa 교토 세포에서 파생된 이 세포주는 정밀한 게놈 수정을 위해 CRISPR/Cas9 기술을 통합합니다. MEGFP(단량체 강화 녹색 형광 단백질) 리포터 유전자를 통합하여 세포 과정을 실시간으로 시각화하고 추적할 수 있어 살아있는 세포에서 유전자 기능, 단백질 위치 및 동적 세포 이벤트를 연구하는 데 강력한 도구가 됩니다.

이 세포주는 신장학 연구, 신약 개발 및 독성학 연구에 특히 유용합니다. 핵 기공 복합체의 구성 요소인 Tpr 유전자의 발현은 핵 수송 메커니즘과 세포 구획화를 이해하는 데 도움이 됩니다. 연구자들은 다양한 세포 경로에서 핵 기공 단백질의 역할을 탐구하기 위해 HK-CRISPR-Tpr-mEGFP 세포를 사용하여 암, 바이러스 감염, 유전 질환에 대한 통찰력을 얻는데 기여하고 있습니다.

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선암종

02분류

생물체
인간
성
여성
성장 특성
준수자
유전자 변형 여부
GMO-S1
유전자 변형 생물(GMO) 여부 상세 정보
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains an mEGFP-tagged Tpr generated via CRISPR, enabling studies of nuclear basket architecture. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
생물안전 등급
1

03특징

형태학
모자이크 돌 모양의 상피 유사 세포

04식별자

인용
HK-CRISPR-Tpr-mEGFP(사이티온 카탈로그 번호 300662)
NCBI 세금 식별번호
9606
예금자
엘렌버그 연구소(EMBL)

05발현 및 감수성

단백질 발현
Tpr, mEGFP 태그

06취급 및 배양

배지
DMEM, w: 4.5g/L 포도당, w: 4mM L-글루타민, w: 3.7g/L NaHCO3, w: 1.0mM 피루브산 나트륨(사이티온 제품 번호 820300a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
10% FBS로 배지를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
30년
민족
아프리카계 미국인