HeLa ląstelės

01Aprašymas

02Bendra informacija

Aprašymas

HeLa ląstelės, gautos iš Henriettos Lacks gimdos kaklelio vėžio ląstelių, yra nemirtinga ląstelių linija, plačiai naudojama biomedicininiuose tyrimuose. Žmogaus ląstelių linija Hela labai prisidėjo prie reikšmingos mokslinių tyrimų pažangos ir toliau atlieka svarbų vaidmenį laboratorijose visame pasaulyje.

1951 m. Henrietta Lacks, jauna penkių vaikų motina, dėl kraujavimo iš makšties kreipėsi į gydytoją Džono Hopkinso ligoninėje, kur daktaras Hovardas Džounsas nustatė, kad jos gimdos kaklelyje yra didelis piktybinis auglys. Tuo metu Johnso Hopkinso medicinos institutas buvo viena iš nedaugelio įstaigų, teikiančių medicininę pagalbą neturtingiems afroamerikiečiams. Henrietai Lacks dėl gimdos kaklelio vėžio buvo taikytas gydymas radžiu, tuo metu buvęs pagrindinis gydymo būdas. Gydymo metu jai buvo atlikta biopsija ir vėžinių ląstelių mėginys nusiųstas į daktaro George'o Otto Gey laboratoriją. Daktaras Gey bandė auginti įvairios kilmės gimdos kaklelio vėžiu sergančių pacienčių ląsteles, tačiau nesėkmingai, kol nebuvo paimtos Henrietos ląstelės, kurios buvo pirmosios ląstelės, kurios nuolat dauginosi, ir tai buvo atradimas, išskiriantis jas iš visų ankstesnių mėginių.

Vėliau buvo nustatyta, kad Henrietos Lacks gimdos kaklelio karcinomą sukėlė žmogaus papilomos virusas (ŽPV). ŽPV yra paplitęs virusas, kuris, be kitų ligų, gali sukelti gimdos kaklelio vėžį. Tyrimai su HeLa ląstelėmis labai padėjo suprasti ŽPV vaidmenį gimdos kaklelio vėžiui, todėl buvo sukurtos prevencinės ŽPV vakcinos, kurios turėjo didelę įtaką mažinant sergamumą su ŽPV susijusiais vėžiniais susirgimais.

Šios nepaprastos ląstelės, pavadintos "HeLa" ląstelėmis pagal Henriettos Lacks inicialus, nuo to laiko tapo labai svarbios medicininiams tyrimams. Jos leido mokslininkams ištirti vėžinių ląstelių augimą, įvairių medžiagų poveikį ir virusų veikimą, o tai labai prisidėjo prie medicinos pažangos, įskaitant vakcinų nuo poliomielito ir COVID-19 kūrimą, nesukeliant etinių problemų dėl tiesioginių eksperimentų su žmonėmis.

HeLa ląstelės plačiai naudojamos genų funkcijos tyrimams, rekombinantinių baltymų gamybai ir genų terapijai dėl didelio transfekcijos efektyvumo ir jautrumo virusinėms infekcijoms. Jos yra labai svarbios tiriant virusų elgseną, įskaitant replikaciją ir patogenezę, ir atliko pagrindinį vaidmenį hepatito B tyrimuose, nes išreiškė viruso baltymus ir padėjo kurti diagnostinius testus bei vakcinas, taip reikšmingai pagerindamos pasaulines sveikatos apsaugos priemones.

HeLa ląstelės tebėra neįkainojamas šaltinis, naudojamas medicinos ir mokslo tyrimuose. HeLa ląstelių ir kitų nemirtingų ląstelių linijų reikšmės neįmanoma pervertinti, nes jos ir toliau formuoja medicinos ir infekcinių ligų tyrimų sritį ir yra ilgalaikis Henriettos Lacks palikimas bei jos indėlis į mokslo pažangą.

Audinys

Gimdos kaklelis

Liga

Adenokarcinoma

Paraiškos

Transfekcijos šeimininkas

Sinonimai

• HELA
• Hela
• He La
• He-La
• Henrietta Lacks cells
• Helacyton gartleri

03Klasifikacija

Organizmas

Žmogus

Seksas

Moteris

Augimo savybės

Prisijungęs

Biologinio saugumo lygis

1

04Charakteristikos

Morfologija

Į epitelį panašus

Kariotipas

HeLa ląstelių linija, pasižyminti sudėtingu kariotipu su dideliu aneuploidijų ir struktūrinių pertvarkymų skaičiumi, pasižymi greitu augimu ir ilgaamžiškumu kultūroje. HeLa ląstelėse paprastai būna 82 chromosomos, nors jų skaičius gali svyruoti nuo 70 iki 164. Pažymėtina, kad 98 % HeLa ląstelių turi mažą telocentrinę chromosomą, o 100 % ląstelių pasižymi aneuploidija dideliame skaičiuje tirtų ląstelių. Šios chromosomų anomalijos lemia jų greitą augimą ir nemirtingumą, taip pat jų ryšį su gimdos kaklelio vėžiu ir kitomis vėžinėmis ląstelėmis.

Laikas, per kurį skaičius padvigubėja

28-36 valandos

05Identifikatoriai

Nuoroda

HeLa (Cytion katalogo numeris 300194)

NCBI mokesčių identifikavimo kodas

9606

Cellosaurus

CVCL_0030

06Išraiška ir jautrumas

Izofermentai

G6PD, A

Jautrumas virusams

Žmogaus adenovirusas 3, Žmogaus poliovirusas 1, Žmogaus poliovirusas 2, Žmogaus poliovirusas 3, Žmogaus poliovirusas 3, Encefalomio-kardito virusas

Atvirkštinė transkriptazė

Neigiamas

Produktai

Keratinas, lizofosfatidilcholinas (lizofosfatidilcholinas (lizo-PC) indukuoja AP-1 aktyvumą ir c-jun N-terminalinės kinazės (JNK1) aktyvumą nuo baltymų kinazės C nepriklausomu keliu

07Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė

EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)

Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai

Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA

Disociacijos reagentas

Accutase

Subkultūrinis auginimas

Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.

Sėjos tankis

1 x 10⁴ ląstelės/cm²

Skysčių atnaujinimas

2-3 kartus per savaitę

Atkūrimas po atšilimo

Atšildžius, išdėliokite ląsteles 2–3 x 10⁴ ląstelių/cm² tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24–48 valandas.

Atšildymas ir auginimas

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

08Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė

Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.

Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

09Donoras

Donoro amžius

30 metų

Etninė priklausomybė

Afroamerikietis

10Teisiniai ir saugos klausimai

Saugos priemonės

Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.

Garantija

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime

Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis

Taip